Том 12, номер 8-август 2006 г.
Исследование
Streptococcus Suis Последовательность Тип 7 вспышки, Сычуань, Китай
Чанюнь Е. * †1 Сяопина Чжу, ‡1 Huaiqi Цзин *1 Huamao Ду *1 Мариела Сегура, §1 Хань Чжен *1 Бяо Кан, Лили Ван * * Xuemei Бай, Yongyun Чжоу * * Чжиган Цуй * Shouying Чжан, Дон Чжин * * На вс * Кси Луо, Чжан Цзи * * Zhaolong Фалуньгун * Ван Синь, Ван Лэй * * Хи ВС * Zhenjun Ли, Qiangzheng ВС * * Honglu Лю, ¶ Boqing Донг, Changwen Ke #, # Хуэй Юаня ** Хуа Вана, † † Kecheng Тян, ‡ ‡ Ю. Ван, † Марсело Gottschalk, § и Сюй Цзяньго * †
* Национальный институт по борьбе с инфекционными болезнями и профилактике болезней, Пекин, Китайская Народная Республика; † государственная лаборатория предупреждении инфекционных заболеваний и борьбе с ней, Пекин, Китайская Народная Республика; ‡ провинции Сычуань Центр по контролю за заболеваниями и профилактике США, Чэнду, Китайская Народная Республика Китай; § Монреальский университет, Монреаль, Квебек, Канада; ¶ Гуанси провинциального центра по контролю за заболеваниями и профилактике США, Наньнин, Народная Республика Китай; # провинции Гуандун Центр по контролю за заболеваниями и профилактике США, Гуанчжоу, Китайская Народная Республика; ** Цзянси провинциального центра по контролю за заболеваниями и профилактике США, Наньчан, Народная Республика Китай, † † Цзянсу провинциального центра по контролю за заболеваниями и профилактике США, Нанкин, Народная Республика Китай, и ‡ ‡ Гуйчжоу провинциального центра по контролю за заболеваниями и профилактике США, Гуйян, Китайская Народная Республика Китай

Предлагаемые Цитирование для этой статьи

Вспышка Streptococcus Suis серотипа 2 возникла летом 2005 года в провинции Сычуань, и спорадических случаев инфицирования в 4 дополнительных провинций Китая. В общей сложности, 99 С. Suis штаммы были выделены и проанализированы в данном исследовании: 88 изолирует человека от больных и из 11 больных свиней. Мы определили 98 из 99 изолятов как импульсный типа I с помощью импульсно-геля области анализа электрофорез SmaI-переваривается хромосомной ДНК. Кроме того, набрав последовательность мультилокусных классифицироваться 97 из 98 членам импульсного типа я в той же последовательности типа (СТ), ST-7. Изолирует Санкт-7 были более токсичны для мононуклеарных клеток периферической крови, чем СТ-1 штаммов. С. Suis СТ-7, возбудитель, была однолокусном варианта ST-1 с повышенной вирулентности. Эти данные убедительно свидетельствуют, что Санкт-7 является новым, высоковирулентной С. Suis клона, что причиной крупнейших С. Suis Вспышка все описано.

Streptococcus Suis, Свиньи патоген, растет в клиническое значение в странах с интенсивным отраслях свиней (1-4). Инфицирования людей считается профессиональным заболеванием, которое затрагивает лиц, которые работают в тесном контакте со свиньями или свинины, субпродуктов (5). В настоящее время 35 капсульного типа или серотипов официальное название; С. Suis серотипа 2 считается самым распространенным и опасным в свиней и людей (6). Первый случай заболевания человека был зарегистрирован в 1968 году, и только 200 случаев были впоследствии сообщили глобально по июнь 2005 года (5). В некоторых азиатских странах, С. Suis может быть второй наиболее распространенной причиной взрослого стрептококкового менингита (7).

Тем не менее, большая вспышка из-за С. Suis серотипа 2 возникла летом 2005 года в провинции Сычуань, Китай. В общей сложности было зарегистрировано 215 случаев, 38 случаев смерти произошли в 202 деревень в 36 уездах. Новые случаи были выявлены в 4 дополнительных провинциях Китая после начала Сычуань. Отличительной чертой этой вспышки было необычно высокий показатель смертности и стрептококковой токсичные shocklike синдром (STSS), а клинические проявления. Действительно, на основе сообщаемых симптомов включена высокая температура, недомогание, тошнота, рвота и диарея, после менингита, подкожных кровоизлияний, токсический шок и кома в тяжелых случаях. Это обострение С. Suis инфекций у человека, такие, как более короткий инкубационный период, более быстрого прогрессирования заболевания, а также высокий уровень смертности, подчеркивает необходимость того, чтобы лучше понять факторы, связанные с С. Suis инфекции.

Целью данного исследования было охарактеризовать и проанализировать возбудителя этой необычной вспышке в связи с его вирулентность и эволюция. Использование мультилокусных последовательности текстов (MLST), мы классифицировали штаммов в одной последовательности типа (СТ), ST-7, СТ-1 комплекса. ST-1 комплекса в значительной степени связано со случаями сепсиса и менингита во всем мире (8). С. Suis СТ-7 выразил предлагается вирулентности маркеров muramidase выпустила белка (MRP), белков внеклеточного фактор (EF), и гемолизина (названный suilysin) (9-11) И был заметно более cytototoxic к человеку мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС), чем представитель ST-1 напряжение.

Методы
Бактериовыделения и идентификации
Все α-гемолитический стрептококковой колонии овец, выращенных на кровяной агар из образцов, полученных от обычно стерильные сайты на человека или больных свиней были определены в качестве С. Suis по API-20 STREP системы (Biomerieux, WeTech, Пекин, Китайская Народная Республика Китай) (Стол). Конкретного серотипа изолятов было квалифицировано как С. Suis капсульного типа 2 с помощью С. Suis сывороток против отдельного конкретного серотипа (предоставляется Statens Serum Institut, Копенгаген, Дания) и подтвержден coagglutination испытания, как сообщалось ранее (12). ПЦР были использованы для выявления генов, кодирующих 16S рРНК С. Suis, За капсулу С. Suis серотипа 2 (cps2J), И для MRP, suilysin (Sly), И Ф., как сообщалось (9,10,13). ПЦР результаты были подтверждены последовательности синтезированных фрагментов. Выражение вирулентности маркеров ППМ, suilysin, Е. Ф. был подтвержден на уровне белка методом Вестерн-блот супернатантов бактериальной культурой, как описано ранее (11).

Импульсные области Гель-электрофорез (PFGE) анализ
Протоколе описываются Бертело-Hérault др.. Использовалась с модификацией, (14). Клетки были ограничены с 25 по U SmaI (Promega, китайско-американском сотрудничестве биотехнологии, Пекин, Китайская Народная Республика Китай). Фрагменты ДНК, были урегулированы путем PFGE с 1% SeaKem Золото агарозном гелях и шеф-DR III система (Bio-Rad, Пекин, Китайская Народная Республика Китай). Сальмонелла enterica серовар H9812 Braenderup с ограниченным XbaЯ была использована для молекулярного веса и размера определений (15). Сходства между рестриктазой профили пищеварения были проанализированы с помощью BioNumerics программного обеспечения (Прикладная математика, Кортрейк, Бельгия).

MLST и филогенетического анализа
Хозяйственные семи локусов гена описано Король и др.. MLST для анализа С. Suis были использованы в данном исследовании: КПН60, DPR, гее,Aroa, THRA, ГКИИ müts кодирующих 60 кДа chaperonin, предполагаемый белка сопротивление перекиси гомологической рекомбинации фактором, 5-enolpyruvylshikimate 3-фосфат-синтазы, aspartokinase / гомосерин дегидрогеназы, глюкоза киназа, и репарации ДНК несоответствие фермент, соответственно (8). Продуктов ПЦР очищали с помощью ПЦР QIAquick колонн продуктом очистки (Qiagen, Гена, Пекин, Китайская Народная Республика Китай), и непосредственно последовательность на обоих концах с ABI Prism 3700 DNA Analyzer системы (Перкин Элмер Applied Biosystems, Уэлсли, Массачусетс, США) (8). Для каждого штамма, аллелей в каждом из 7 локусов определен генетический профиль или СТ. MLST информации в С. SUIС базой данных определили филогенетической позиции изолятов, собранные в этой вспышке расследование (8). eBURST была использована для выявления клональный комплексов в С. Suis и для отображения общей структуре населения в базе данных на MLST http://ssuis.mlst.net (16,17). Эта база данных содержит 92 ранее описанных ЗП от изолятов, полученных из различных источников, в том числе больные свиньи и человека пациентов из разных стран. Байесовский максимального правдоподобия деревья были реконструированы MrBayes с версии 3.1.1, а максимальная вероятность деревья были сделаны с моделью HKY85 (18).

Цитотоксичности
Бактериальный цитотоксичности и PBMCs здоровых доноров определяли как описано ранее (19). PBMCs были посеяны в конечной концентрации 106 клеток / мл в 24-и пластин и инкубировали в течение 4 часов при 37 ° С в присутствии ≈ 107 КОЕ / мл С. Suis SC84 деформации и SC22 (2 выбран в качестве представителя штаммы из вспышка Сычуань и изолированы от 2 человек больных с STSS) или С. Suis Эталонный штамм 31533 использоваться в качестве контроля. Штамм 31533, изолированных от свиньи с менингитом во Франции, был опасный в свиноводстве моделей инфекции и токсичных к нескольким типам клеток хозяина (19,20). Бактериальный цитотоксичность оценивали лактатдегидрогеназы измерений с цито-96 Ток Cytoxicity Kit (Promega, Madison, WI, USA) в соответствии с инструкциями производителя. Процент цитотоксичность рассчитывается как (образец оптической плотности [OD]490 - OD0%) / (OD100% - OD0%) × 100, где ОД0% представляет ОД490 от неинфицированных клеток и ОД100% представляет ОД490 клеток, обработанных с лизис буфера, как указано заводом-изготовителем. Пустая клетка скважин с питательной средой служит только пробелы.

Результаты
В общей сложности, 99 С. Suis штаммы были выделены в этом исследовании (Стол): 88 человек из 11 пациентов и от больных свиней. Из 88 человек локализует 1 каждый из них был из Гуандун, Цзянси, Гуйчжоу и Гуанси. С начала Сычуань летом 2005 года мы нашли 84 человек изолятов, распространенного в 63 административных деревень из 29 уездов, и включил их в этом исследовании. Два штамма, 1 человек из пациентов и 1 из больных свиней в провинции Цзянсу в течение 1998 С. Suis вспышки, также были включены для определения возбудителей за 2 вспышки были клональный (21).

Из 11 свиней, взятых в 2005 году, 8 были из провинций Сычуань и 3 были из провинции Цзянси. Один из 8 изолятов из провинции Сычуань, названный SC16, происходит от 1 больной свиньи в стаде. Человека больного, забитого и обработанного в первые больные свиньи в том же стаде, заболел 6 часов спустя и умер через 18 часов после начала заболевания. 3 изолирует от Цзянси были изолированы от инфицированного мяса с образцами холодного хранения дома. Зараженный человек пациент, который обрабатывается мяса.

Все штаммы были определены как серотип 2 с помощью диагностического сыворотка против С. Suis и подтверждены coagglutination метода с конкретным типом 2 сыворотки (12). Личность как изоляты С. Suis серотипа 2 было дополнительно подтверждено положительным ПЦР для генов, кодирующих 16S рРНК С. Suis и за капсулу С. Suis серотипа 2 (cps2J).

ПЦР показала все выделенные штаммы, чтобы оказать положительное влияние на вирулентности генов, кодирующих MRP, suilysin (Sly) И EF (9,10). ПЦР результаты были подтверждены в нуклеотидной последовательности. Десять выбранных штаммов имели положительную реакцию на suilysin, EF, MRP и Вестерн-блот, специфические антитела, как описано выше, в котором подтверждается выражением этих вирулентности связанные гены (11). Мы видели никаких признаков того, С. Suis была передана от человека к человеку, и почти все пациенты имели контакт с инфицированными свиней или мяса (22).

Рисунок 1

Рисунок 1. Импульсные поле гель-электрофореза (PFGE) профили отдельных изолятов из разных уголков Китая. Все изоляты Streptococcus Suis Были переваривают SmaI. ..


Рисунок 2

Рисунок 2. Народонаселение снимок Streptococcus Suis. Всего С. Suis мультилокусных типу базы данных, последовательность отображается в виде одного eBURST диаграмма ...


Рисунок 3

Рисунок 3. Цитотоксический Streptococcus Suis Последовательность типа (ST) 7 человек мононуклеарных клеток периферической крови. Данные были получены от 3 экспериментами ...


Рисунок 4

Рисунок 4. Неукорененное байесовское дерева каскадные последовательности последовательность 92 типов (ПТУ) в Streptococcus Suis. Дерево было построено с помощью MrBayes (версия 3.1.1) ...

PFGE эффективно обнаружена связь между генетическим фоном, вирулентности черт, и эпидемиологические последствия многих бактериальных патогенов. Вела и др.. Проанализированы 302 С. Suis клинических изолятов различные серотипы из разных стран и определил 60 различных видов пульса, 50% из которых соответствовал одному типу импульса. Один тип представлен импульсом 46,3% свиней изолятов, которые могут быть связаны с более высокой или потенциально патогенных для более широкого распространения экологической (23). В этом исследовании, хромосомной ДНК переваривают SmaЯ была проанализирована в 101 изолятов, описанные в Стол. Результаты показали, 2 типа импульса. Импульсного типа я был найден в 100 из 101 изолятов, в том числе от человека пациентов и больных свиней из провинций Сычуань и 4 других провинциях: Цзянси, Гуандун, Гуанси, и Цзянсу (Рисунок 1). Этот факт показывает, что импульс типом я был главной причиной вспышки этого человека и что возбудителем была клональный. Только 1 изолировать, GZ1, изолированных в августе 2005 года и имеющие несколько иной профиль PFGE, было от человека больного в провинции Гуйчжоу (Рисунок 1).

Хотя PFGE сети на основе PulseNet International, используется во всем мире для молекулярной эпидемиологии, базы данных не доступны для С. Suis для дальнейшего сравнения генетического родства среди изолятов из различного происхождения. MLST определяет штаммы с помощью последовательностей на 7 локусов хозяйствование и стала методом выбора при решении вопросов, связанных эпидемиология, население и эволюционной биологии. Сеть MLST, http://www.mlst.net, Позволяет быстро лаборатории характеризовать их штаммы, связаны с ними, которые были представлены другими, и сравните их с патогеном населения в целом по сети Интернет (16,24). Хозяйственные выбраны 7 локусов генов из всех 101 С. Suis изолятов были усиливается и последовательность действий. Последовательностей ДНК из 7 локусов всех изолятов были определены (DQ205243-51), и аллельных профили были назначены и представлены в базе данных для MLST С. Suis (http://ssuis.mlst.net) (8). В нашем исследовании, 99 из 101 изолятов были определены в качестве СТ-7, включая все 92 человек, выделенных у больных и больных свиней собранных во время вспышки Сычуань в 2005 году, а также 2 изолирует от начала Цзянсу в 1998 году (с 1 человека Пациент и 1 из больных свиней). Кроме того, изолирует от Цзянси (1 человек и 3 свиньи изолятов) и Гуандун (1 человек изолировать), полученных в ходе лета 2005 года были также распределены по СТ-7. Один человек изолировать больного в Гуйчжоу (штамм GZ1) и 1 человек изолировать от Гуанси (штамм GX1) были определены как ST1 (DQ205251). Штамм GZ1 показал PFGE профиля, который несколько отличается от положения Сычуань изолятов (Рисунок 1, Пульс тип II). Тем не менее, штамм был GX1 импульсного типа я аналогичного профиля на что из провинции Сычуань изолятов. Эти результаты показывают, что MLST является более мощной дискриминационной и эпидемиологической инструментом.

Чтобы получить информацию о происхождении и отношений между Санкт-7 и другие СТС, мы оценивали генетическое разнообразие населения всего С. Suis МТЛС eBURST с базой данных, которая делит MLST данных любого размера в тематические группы изолятов и их клонах комплексы, прогнозирует наследственный генотип для каждого клональный сложным, и вычисляет значение загрузке родством. Используя эту технику, мы показали, бактериальный клональный разнообразия С. Suis и представили доказательства для появления новых клонов частности клиническая релевантность (17). Население снимок всех изолятов С. Suis порожденных eBURST, включая наших 101 изолятов вместе со всеми 294 изолятов с имеющимися данными MLST, показал 6 основных групп связанных между "СТС" и многочисленных отсоединил STS. Из отсоединил СТС ", мы отметили 6 СТ комплексы с одной траектории, а некоторые варианты с двойными локус варианты (8,17). Перемешаны с клональный этих комплексов были небольшими группами, как правило, вступил дублетов и индивидуально отсоединил СЦ, которые не были однолокусном варианты любых других СЦ в базе данных (Рисунок 2).

6 основным клональный комплексы с одно-и двухместные варианты локусов были СТ-1, СТ-17, СТ-27, СТ-61, СТ-29, СТ-87 (Рисунок 2). Основные клональный комплекса С. Suis, СТ-1, содержащийся изолирует от людей и свиней, которые были инвазивными болезней или были здоровыми носителями и включал, помимо серотипа 2, изоляты серотипы 1, 1 / 2, 3, 8, 14 и 1 / 14. СТ-1, оригинальный штамм СТ-1 комплекса (с поддержкой загрузке 100%), свиней включает изоляты из Англии (83), Испания (44), Нидерландов (3), Франция (4) и Гонконг (5 ), она является преобладающей ST ответственность за большинство инфекций свиньи во всем мире.

СТ-7 могут быть получены от СТ-1, первичные напряжения клональный СТ-1 сложным, и она может быть причиной инфекций человека в провинции Сычуань. СТ-7 (ST профиль 1,1,1,1,1,1,3) (DQ205243-50) и СТ-1 (ST профиль 1,1,1,1,1,1,1) (DQ205243-51 ) могут быть диверсифицированы по ступенчатой накопление точечных мутаций. Кроме того, СТ-7, возможно, лишь совсем недавно разошлись, так как он показал высокий уровень сходства с точки зрения как аллельных профилей и последовательности их неоднозначного аллели. Таким образом, тесно связаны СТ-1 и СТ-7 Доля 6 локусам идентичны и имеют 1 локуса, thyA, Отличаясь лишь на одного нуклеотида (Рисунок 2). Поскольку гены домашнего хозяйства признаются в качестве стабильного ядра бактериального генома, это расхождение также свидетельствует о появлении новых вирулентных ST.

Использование eBURST анализ базы данных МТЛС, мы также рассмотрели изолятов С. Suis серотипа 2 человека от больных или больных свиней, которые были экспериментально показано, в высшей степени опасный свиней в моделях инфекция (8,20,25). Шесть из 7 так называемых вирулентных штаммов высокой принадлежал к СТ-1, в том числе 1 штамм, выделенный от больного с менингитом в Англии (H11 / 1) и 1 штамм, выделенный от бойни работника с менингитом в Гонконге (87555). Другим весьма вирулентных штаммов (89-1591), выделенные из поросенка с сепсисом было ST-25, одного локуса варианта ST-29 комплекса (26).

Обсуждение
Штаммы, выделенные из человеческого больных (в том числе из базы данных MLST и это исследование) могут быть объединены либо в СТ-1, СТ-6, СТ-7, и ST-84 (ST-1 комплекса) или СТ-25 (ST - 29 комплекс) по MLST. ST-1 включает в себя 10 изолятов С. Suis серотипа 2 оправился от инфекции, человек во Франции (N = 4), Англии (N = 1), и в Гонконге. Гонконг штаммы были выделены в 1985 году (N = 1), 1995 (N = 3) и 1997 (N = 1). Кроме того, СТ-1 также включает в себя 1 штамм С. Suis серотипа 14 изолирован от пациентов в Англии. ST-25 содержит лишь 3 серотипа 2 штаммы изолированы от человеческого пациентов в Канаде (27,28). ST-6 содержится штамм серотипа 14 изолирован от человека пациентов в Нидерландах (29). До нашего исследования, лишь 1 член Санкт-7 был выделен из крови пациентов с сепсисом, в Гонконге в 1996 году (8,30). СТ-1 и СТ-29 комплексов высоковирулентной клоны С. Suis населения, и СТ-1 клональный комплекс является основным комплексом С. Suis с общественным здоровьем и последствия несет ответственность за большинство инфекций человека. 3 изолятов в ST-25 нет ни одной из признанных вирулентности генов С. Suis: EF, MRPИ Sly. Таким образом, мы предлагаем СТ-1 клональный комплекса является доминирующим высоковирулентной сложным и может нанести большой человек С. Suis Вспышки инфекции. Потенциал СТ-7 в качестве нового вирулентных клонов в СТ-1 сложных Далее было предложено по результатам получены с помощью анализа цитотоксичности с человеческими PBMCs. Как показано в Рисунок 3, Живой бактериальной клетке суспензий, приготовленных из С. Suis штаммами SC84 и SC22 (СТ-7), изолированной от человека у больных с STSS в провинции Сычуань, были значительно более токсичны, чем в PBMCs С. Suis Эталонный штамм 31533 (СТ-1), когда клетки инкубировали> 2 часа в аналогичных условиях роста бактерий. Штамм 31533 вирулентных было у мышей и свиней моделей инфекции, и был токсичен для нескольких типов клеток хозяина, как показано в процессе искусственного анализы (19). Таким образом, эта разница в цитотоксичность является не только значительное, но также имеет отношение к молниеносной характеристики вспышки Сычуань.

Это предположение подкрепляется филогенетического анализа последовательностей из 92 НТО 7 С. Suis Хозяйственные генов (Рисунок 4). Чтобы показать, филогенетические связи между СТ-1 сложная и генетической популяции С. SuisМы рассмотрели возможность того, что филогенетические данные были достаточно построить дерево родства между членами "СТС" и, в частности, для вирулентных клональный СТ-1 комплекса. Филогенетический анализ показал, 6 линий в пределах С. Suis населения. Ранее выявленных комплексы ST-61, СТ-27 и СТ-87 были размещены в линиях 2, 5 и 6, соответственно, большинство из ЗП только одно изолировать. ST-29 комплекса, который содержит человеческие изоляты ST-25 находится в Lineage 5. Клональный СТ-1 Комплекс представляет собой единую линию и, как представляется, доминирует в различных местах (8). Он имеет 4 п. для изолирует человека, СТ-1, СТ-6, СТ-7, и ST-84, который, возможно, произошли от общего предка (Рисунок 4). В этом комплексе, С. Suis СТ-7 появился первый в Гонконге в 1996 году, вызвал 28 случаев в провинции Цзянсу в 1998 году, и несет ответственность за крупной вспышкой человек С. Suis инфекции в истории, которые произошли в провинции Сычуань, Китай, в 2005 году и привел в 215 случаях и 38 смертельных исходов (8,21,30).

Высокий уровень смертности в провинции Сычуань вспышка имеет большое беспокойство, поскольку несколько человек С. Suis инфекций являются фатальными. Это увеличило вирулентность может быть связано с горизонтальный перенос генов из возможных новых токсин или Суперантиген в соответствии с наиболее соответствующими клиническими проявлениями этой вспышки, т. е. STSS. В последнее время обмены гена устойчивости были зарегистрированы между свиней С. Suis и различные виды стрептококковой человек, в том числе С. pyogenes. Таким образом, перенос генов из свиного стрептококка к человеку и наоборот, возможно, хотя и на низких частотах (31). Поэтому, С. Suis СТ-7 может быть новым опасным инфекционным заболеванием. Этот необычный С. Suis Клон может распространяться дальше по всей территории Китая и остального мира; распространения могут стать более выраженными в условиях быстрого развития экспортного бизнеса.

Благодарности
Мы благодарим смесь акриловых мономеров Whatmore и S.J. Король за помощь в анализе MLST.

Эта работа была поддержана грантами (2005CB522904 и 2003BA712A02 к JGX) из министерства науки и техники, Китайская Народная Республика Китай.

Д-р Е. является микробиолог. Ее основные научные интересы в новых инфекционных заболеваний. Она является лидером группы по изучению С. Suis инфекции в Китае.

Список литературы
Бадделей PG. Streptococcus Suis инфекции. Occup Med (Lond). 1995; 45:222.
Халаби T, Hoitsma E, R Hupperts, Спаньярд L, M Luirink, Jacobs J. Streptococcus Suis менингитом, риск Браконьерская. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2000; 19:943-5.
Juncal А.Р., Пардо Ж, я Родригес, Перес дель Molino ML. Менингит по Streptococcus Suis [Статья на испанском языке]. Enferm Infecc Microbiol Clin. 1997; 15:120-1.
Staats JJ, Федер я Okwumabua O, Ченгаппа ММ. Streptococcus Suis: Прошлое и настоящее. Vet Res Comm. 1997; 21:381-407.
Dupas D, Виньон М, Geraut C. Streptococcus Suis менингита. Некомпенсированного серьезные профессиональные заболевания. Occup J Med. 1992; 34:1102-5.
Gottschalk М, М. Сегура Патогенез менингита Streptococcus Suis: Нерешенные вопросы. Vet Microbiol. 2000; 76:259-72.
Suankratay C, Intalapaporn P, Nunthapisud P, K Arunyingmongkol, Wilde H. Streptococcus Suis менингита в Таиланде. Юго-Восточной Азии J Trop Med здравоохранения. 2004; 35:868-76.
Король SJ, Leigh JA, Heath PJ, Луке я Tarradas С, К. Доусон и др.. Развитие мультилокусных последовательности вводить схемы для свиней патоген Streptococcus Suis: Определение вирулентных клонов и потенциальные капсульные обмена серотипа. J Clin Microbiol. 2002; 40:3671-80.
Wisselink HJ, Reek FH, Vecht U, Stockhofe-Zurwieden N, М. Смит, Смит HE. Обнаружение вирулентных штаммов Streptococcus Suis Тип 2 и высоко вирулентных штаммов Streptococcus Suis Тип 1 в образцах миндалин свиней методом ПЦР. Vet Microbiol. 1999; 67:143-57.
Staats JJ, Plattner Б. Стюарт GC, Changappa ММ. Наличие Streptococcus Suis ген suilysin и выражения ППМ и EF коррелирует с высокой вирулентности Streptococcus Suis Тип 2 изолятов. Vet Microbiol. 1999; 70:201-11.
Бертело Эро-F, H Morvan, Keribin А.М., Gottschalk М, М. Kobisch Производство muraminidase выпустила белка (MRP), внеклеточный фактор (EF) и suilysin полевых изолятов Streptococcus Suis капсульного типа 2, 1 / 2, 9, 7 и 3 изолированные от свиней во Франции. Vet Res. 2000; 31:473-9.
Хиггинс R, Gottschalk М. Обновление Streptococcus Suis идентификации. J Vet Диаг Инвест ". 1990; 2:249-52.
Marois C, Bougeard S, Gottschalk М, М. Kobisch Мультиплекс ПЦР-анализ для обнаружения Streptococcus Suis виды и серотипа 2 и 1 / 2 в миндалинах живых и мертвых свиней. J Clin Microbiol. 2004; 42:3169-75.
Бертело Эро-М, Marois C, Gottschalk М, М. Kobisch Генетическое разнообразие Streptococcus Suis штаммы изолированы от свиней и людей как показали импульсно-электрофореза геля области. J Clin Microbiol. 2002; 40:615-9.
Hunter С.Б., Vauterin P, Ламберт-ярмарка М.А., ван Дуйне М.С., Kubota K, L Могилы и др.. Создание универсального размера стандартного штамма для использования с PulseNet стандартизированных импульсным полем электрофореза геля протоколы: преобразование национальных баз данных на новый стандарт размеров. J Clin Microbiol. 2005; 43:1045-50.
Aanensen Д.М., Спратт BG. Мультилокусных последовательность ввода сети: mlst.net. Acids Res. 2005; 33: W728-33.
Файль EJ, Ли до н.э., Aanensen Д.М., Hanage WP, Спратт BG. eBURST: выведение модели эволюционного происхождения среди групп связанных с генотипами бактериальных мультилокусных последовательность ввода данных. J Bacteriol. 2004; 186:1518-30.
РЕНКВИСТ Ж, Huelsenbeck JP. MrBayes 3: Bayesian филогенетические выводы по смешанной модели. Биоинформатика. 2003; 19:1572-4.
Ванье G, M-Сегура, Фридл P, S Lacouture, Gottschalk М. Нашествие свиных мозгов эндотелиальные клетки Streptococcus Suis серотип 2. Infect Immun. 2004; 72:1441-9.
Vecht U, Wisselink HJ, Stockhofe-Zurwieden N, Смит HE. Характеристика вирулентности Streptococcus Suis серотипа 2 эталонного штамма Henrichsen S 735 новорожденного gnotobiotic свиней. Vet Microbiol. 1996; 51:125-36.
Чжу F, H Ян Ху X, H Ван, Ван G, Y песни и др.. Однородность исследование Streptococcus Suis изолированы от человеческого и свиней [Статья на китайском]. Zhonghua Bing Xing Лю Сюэ За Чжи. 2000; 21:427-9.
Ю. Н, Цзин H, Chen Z., Чжэн H, Zhu X, Ван H, и др.. Человек Streptococcus Suis Вспышка, Сычуань, Китай. Emerg Infect Dis. 2006; 12:914-20.
Вела А.И., Goyache J, C Tarradas, Луке я, Матеус, Морено М.А., и др.. Анализ генетического разнообразия Streptococcus Suis клинических изолятов от свиней в Испании импульсно-электрофореза геля области. J Clin Microbiol. 2003; 41:2498-502.
Cooper JE, Файль EJ. Мультилокусных последовательность ввода-разрешается Что? Trends Microbiol. 2004; 12:373-7.
Галина L, C Pijoan, Sitjar М, Christianson WT, Россов K, Collins JE. Взаимодействие между Streptococcus Suis серотипа 2 и свиней репродуктивного и респираторного синдрома вирусов в конкретных патогенных свободный поросят. Vet Rec. 1994; 134:60-4.
Quessy S, Дюбрель JD, Caya М, Р. Хиггинс Дискриминация сильнодействующих и авирулентные Streptococcus Suis капсульного типа 2 изолятов из разных географических происхождение. Infect Immun. 1995; 63:1975-9.
С. Мишо Streptococcus Suis Менингит: первый случай сообщили в Квебеке. Can J Infect Dis. 1996; 7:329-31.
Trottier S, R Хиггинс, Brochu G, Gottschalk М. Один случай заболевания человека в связи с эндокардитом Streptococcus Suis в Северной Америке. Rev Infect Dis. 1991; 13:1251-2.
Gottschalk М, Хиггинс R, Жак М "Миттал КР, Henrichsen J. Описание 14 новых капсульного типа Streptococcus Suis. J Clin Microbiol. 1989; 27:2633-6.
Кей R, Ченг Ф., TSE CY. Streptococcus Suis инфекции в Гонконге. QJM. 1995; 88:39-47.
Мартель, Decostere, Leener Е.Д., Марьена М, Graef Е.Д., Heyndrickx М, и др.. Сравнение и передачи ERM (Б) между генами человека и сельскохозяйственных животных стрептококки 6. Microb Drug Resist. 2005; 11:295-302.
Цифры
Рисунок 1. Импульсные поле гель-электрофореза (PFGE) профили отдельных изолятов из разных уголков Китая. Все изоляты Streptococcus Suis Были переваривают SmaI. ..
Рисунок 2. Народонаселение снимок Streptococcus Suis. Всего С. Suis мультилокусных типу базы данных, последовательность отображается в виде одного eBURST диаграмма ...
Рисунок 3. Цитотоксический Streptococcus Suis Последовательность типа (ST) 7 человек мононуклеарных клеток периферической крови. Данные были получены от 3 экспериментами ...
Рисунок 4. Неукорененное байесовское дерева каскадные последовательности последовательность 92 типов (ПТУ) в Streptococcus Suis. Дерево было построено с помощью MrBayes (версия 3.1.1) ...http://www.cdc.gov/ncidod/eid/vol12no08/06-0232.htm

Стол

Рак поджелудочной железы
Сахарный регрессия рака intratumoural инъекций жить Streptococcus pyogenes В сингенных модель мыши
С Maletzki1,
М Linnebacher2,
B Kreikemeyer3,
J Emmrich1
+ Автор связи

1
Отделение гастроэнтерологии, Отдел внутренней медицины, Университет Ростока, Росток, Германия
2
Кафедрой общей, торакальной, сосудистой хирургии и трансплантологии, Университет Ростока, Росток, Германия
3
Отдел медицинской микробиологии и гигиены больница, Институт медицинской микробиологии, вирусологии и гигиены, Университет Ростока, Росток, Германия
С Maletzki, Отделение гастроэнтерологии, Отдел внутренней медицины, Университет Ростока, Эрнст-Heydemann-Str. 6, D-18055 Rostock, Germany; Claudia.Maletzki @ Uni-rostock.de
Пересмотренная 28 сентября 2007
Принимаемые 6 ноября 2007
Опубликована первая онлайн 19 ноября 2007

Следующий раздел
Аннотация
Справочная информация: Это исследование имя потенциал бактериолитический терапии с использованием Streptococcus pyogenes В сингенных поджелудочной мышиной модели рака.

Методы: Panc02 опухоли либо были инфицированы S pyogenes или лечились эквивалентный объем транспортного средства. В дополнение к оценке опухоль гистологии и иммуногистохимии, изолированные спленоцитов были проанализированы с помощью проточной цитометрии. Интерферон (IFN) γ секреции как реакция спленоцитов против опухолевых клеток было показано, через технику ELISPOT. Цитотоксического эффекта лимфоцитов с целью опухоль была обнаружена лактатдегидрогеназы (ЛДГ) освобождение. Были измерены уровни цитокинов в сыворотке крови.

Результаты: Однократного применения живых бактерий в штатные опухолей Panc02 привели в полной регрессии опухоли. Это antitumoural эффектом сопровождалось массовым лейкоцитарной инфильтрации в опухоли, а также значительный и устойчивый высота системного уровня провоспалительных цитокинов IFNγ, опухоли α фактор некроза и интерлейкин-6. Лимфоцитов получены от мышей конкретно признали сингенных клеток опухоли в IFNγ-ELISPOT и, самое главное в клеточной цитотоксичности анализов, указывающие на опухоль-специфического иммунного ответа.

Выводы: Мы предоставляем данные, как прямые, так литической активности S pyogenes опухолевых клеток к инфекции и механических инфильтрация опухоли клетками иммунной системе приводят к повреждению клеток опухоли после распространения опухоли компоненты. Последний результат позволяет активации опухоли конкретного эффекторных клеток, скорее всего в осушение лимфатические узлы, способствует провоспалительных контексте. Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что применение живой S pyogenes может быть перспективным новая стратегия лечения для продвинутых больных раком поджелудочной железы, которая требует дальнейшего изучения.

Предыдущий разделСледующий раздел
Цель иммунотерапии является стимуляция иммунной системы, чтобы восстановить свою способность распознавать и реагировать на остаточные опухолевые клетки, и это может быть полезным дополнением к обычной противоопухолевой стратегии.1 Иммунотерапия началась более 100 лет назад, когда Нью-Йорк хирург Уильям B Коули отметил, что злокачественные опухоли, в частности, саркома, регрессировал у пациентов, которые развитые одновременных бактериальная инфекция после хирургической резекции.2 Таким образом, прививки токсин Коули's, бактериальная вакцина Streptococcus pyogenes и Serratia marcescens, Стала краеугольным камнем в развитии иммунотерапии онкологических заболеваний. Пациенты, кто пережил болезнь инфекционные процессы, включая высокую температуру и озноб, а также испытали благотворное влияние на злокачественности и, наконец, вылечить их опухолей путем развития мощного иммунного ответа.2

Основываясь на этой первоначальной работы, исследователи разработали множество различных видов иммунотерапии, включая передачу иммунных клеток активных например, лимфокин-активированных клеток, применение моноклональных антител (МоАТ), активация специфических клеток эффекторных опухолью Сотовый лизатами или выдержки, а также активизация неспецифических эффекторных клеток (макрофагов, естественных киллеров (NK) клеток) микробных или химических адъюванты.1 Интересно, что закапывание жизнеспособной ослабленные микобактерии БЦЖ-конкретно-прежнему успешно используется в клиническом лечении поверхностного рака мочевого пузыря.3 Сегодня хорошо известно, что как прямое tumouricidal эффекты и активация иммунной системы посредников эти противоопухолевые деятельности бактерий или их компонентов.4--6 В последнее время некоторые группы разработали новые подходы с использованием antitumoural опухоль-терапевтических бактериальных штаммов. Yazawa и др. описали селективный потенциал роста анаэробных Bifidobacterium Longum в гипоксической регионов несколько видов твердых опухолей.7 8 Аналогичным образом, Фогельштейн и сотрудники разработали эффективную терапию antitumoural путем объединения внутривенного введения смертоносного токсин свободно споры Clostridium новый со стандартной химиотерапией.9 10 Совсем недавно, Чжао и др. создал ослабленный штамм Сальмонелла Typhimurium которые избирательно растет и убивает клетки опухоли простаты в обнаженная модель мыши.11

Учитывая мрачные прогнозы для больных с протоковой аденокарциномы поджелудочной железы,1 12 Роман иммунотерапевтическим возможностей вмешательства должны быть разработаны для лечения этой злокачественной.4 13--16 Streptococcus pyogenes является важным факультативно анаэробных патогенов, которые могут вызывать инфекции различной степени тяжести в организме человека, начиная от простых, не гнойных инфекций глотки и кожи к угрожающим жизни инвазивными инфекциями.17 В настоящей работе мы попытались решить вопрос о том, бактериолитический терапии с использованием S pyogenes применяется для лечения рака поджелудочной железы. Для достижения этой цели, мы проанализировали воздействие одного intratumoural инъекций S pyogenes на установленных мышиных опухолей поджелудочной железы в сингенных модель мыши. Это одно применение S pyogenes привели к полной регрессии опухоли в течение 4 недель. Массовые активации иммунных механизмов реагирования вторичными по отношению к инфекции сопровождаются регрессии и способствовали искоренению опухоли.

Таким образом, S pyogenes может быть отличным кандидатом для оценки активной противоопухолевой терапии. Эти результаты могут представлять особый интерес для клинических аддитивных лечении больных с опухолями поджелудочной железы.

Предыдущий разделСледующий раздел
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Клеточные линии и мышей
Panc02 клеток (любезно предоставлены д-р Арно Шольц, Шарите-медицинский университет Берлина, Берлин, Германия) были первоначально созданы по Корбетт и его сотрудниками в 1984 году 3-МЕТИЛХОЛАНТРЕНОМ лечение pancreata женщин C57Bl / 6 мышей.18 EL4 клеток лимфомы и ректальной полиплоидных клетки карциномы CMT-93 были представлены American Type Culture Collection (Манассас, VA). Фибробластоподобных MC3T3-E1 клетки были приобретены у Deutsche Sammlung фон Mikroorganismen Und Zellkulturen (Брауншвейг, Германия). Все данные были сохранены в модифицированной среде Игла Дульбекко's (DMEM; Биочром AG, Берлин, Германия), с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ПАК, Кельбе, Германия) и 1% пенициллина / стрептомицина (Инвитроген, Карлсруэ, Германия), и инкубировали при 37 ° С в увлажненной атмосфере 5% CO2. Женские 8-10-недельного возраста мыши C57Bl/6N были приобретены у Charles River вкл. (Зульцфельд, Германия). Животные подвергались воздействию циклы 12 ч light/12 ч темноты и получили стандартный продовольствием и водой неограниченное объявлений. По утверждению местных комитетов по благосостоянию животных, эксперименты проводились в соответствии с немецким законодательством о защите животных, а также "Руководство по уходу и использованию лабораторных животных".

Бактериальный штамм, условия и культура
Одну группу стрептококковой изолировать, S pyogenes серотип М49 (штамм 591), культивируют в Тодда-Хьюитт (TH) бульоне или на TH агар (Oxoid Unipath, Везель, Германия), и дополнить с 0,5% дрожжевого экстракта (THY), была использована в данном исследовании. Для intratumoural инфекции, S pyogenes был выращен в бульоне TH ночь до середины журнала фазу и доводили до концентрации около 1 × 106 Колония-единиц (КОЕ) / мл на основе оптического считывания плотность при 600 нм и на обшивке анализа.

Животный опухоль модели и применение бактериальных
Краткое под наркозом эфира, у мышей-самок C57Bl/6N вводили подкожно в правую заднюю фланге с 1 × 106 Panc02 клеток. Объем перерастает опухолей были оценены в соответствии со следующей формулой: ширина2× длина × 0,52.9 Когда опухоль достигла размеров около 60 мм3, Около 9-12 дней после инокуляции опухоли клетки, одна группа была заражена intratumourally с 1 × 106 КОЕ / мл S pyogenes (50 мкл том, растворенных в фосфатно-буферном растворе (PBS), N = 28). Животные, которые получили эквивалентные объемы растворителя один служил в качестве транспортного средства обращению управления (транспортное средство, N = 6). Группа без intratumoural инъекций служила опухоль несущих контроля (опухоли, N = 6). Дополнительные группы опухолей, свободных животным относиться с 1 × 106 КОЕ / мл S pyogenes внутрикожно в правую заднюю фланга (М49-C, N = 6). Физиологическое значение контроля были получены от животных без какого-либо вмешательства (контроль, N = 3). Мышей пожертвовала 7, 14, 21 и 28 дней после бактериальная инфекция, или когда они стали умирающий перед опухоль объем достиг 1500 мм3. В конце каждого эксперимента образцы крови, опухоли, селезенку и лимфатические узлы брыжейки были удалены от животных всех групп для дальнейшего анализа. Чтобы оценить частоту системной распространения S pyogenes, Образцы крови у всех зараженных животных были приняты в заданных точках времени (день 7, 14, 21 и 28) и при посеве на овец кровяной агар.

Rechallenge эксперимент
Через четыре недели после иммунотерапии S pyogenes, Успешно лечил и М49-С животными (каждый N = 6), полученные tumourigenic доза Panc02 опухолевые клетки (1 × 106) Во фланг, на контралатеральной стороне первого применения опухоли. Опухоль объемы были измерены два раза в неделю, как описано выше, за 4 недели до euthanised животных.

Апоптоз анализа
Для обнаружения апоптоз, клетки и впоследствии trypsinised лизированной. Количественной оценки активности каспазы 3, Б. Д. ApoAlert каспазы пробирного пластинка была использована в соответствии с инструкциями изготовителя (BD Biosciences, Гейдельберг, Германия). Каспазы 3 активность определяли флуорометрического обнаружения на Cytofluor 2300 (Millipore, Schwalbach, Германия, EX / EM: 380/460 нм).19 Кроме того, апоптоз была количественно с помощью проточной цитометрии суб-G1 анализа пиков как описано выше.20

Гистологии и иммуногистохимия
Лейкоциты в резекции опухоли тканей, окрашенных по CAE (хлорацетат эстераза) техники. Количества лейкоцитов / мм2 были определены в ослепила рассчитывает положительной окраски и морфологии в 50 последовательных полях высокой мощности (HPFS). Для подтверждения лейкоцитарной инфильтрации опухоли в массе, срезах ткани инкубировали с анти-коза мыши CD4 (1:100, Санта-Крус биотехнологии, Гейдельберг, Германия), крысы против мыши CD8 (1:200, Санта-Крус биотехнологии) и кроликов анти-CD88 мыши (1:200, Санта-Крус) антител в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем щелочной фосфатазы, конъюгированных антителами мыши (Санта-Крус). Сайты фосфатазы обязательными были обнаружены помощью фуксин как хромоген. Counterstained срезов гематоксилин и изучены с помощью световой микроскопии (Axioskop 40, Zeiss, Оберкохен, Германия).

Проточная цитометрия
СПЛЕНОЦИТАХ были выделены в различные моменты времени от инфицированных и неинфицированных животные помощью Ficoll-Paque PLUS (Amersham Biosciences, Упсала, Швеция) Градиент центрифугирования. Впоследствии клетки были названы следующие изотиоцианата флуоресцеина (FITC) конъюгированных крысы против мыши МКАТ: CD4, CD8, CD11b, Gr1, CD62L (1:20, Miltenyi Biotec, Бергиш-Гладбах, Германия), CD25 и CD71 (1 : 20, BD Pharmingen). Образцы анализировались на FACSCalibur цитометра (BD Pharmingen) с помощью программного обеспечения CellQuest.

ELISPOT анализа интерферона γ-секретирующие лимфоциты
Интерферон γ (IFNγ) конкретные МАБ (Mabtech, Гамбург, Германия) с покрытием, 96-а microtitre пластины были заполнены с 1 × 104 клетки-мишени / а (Panc02, EL4, CMT-93, MC3T3-E1 и мононуклеарных клеток периферической крови (PBMCs)) и инкубировали в течение 2 ч. СПЛЕНОЦИТАХ (105) Была предоставлена на цели и совместное культурное одночасье. Наконец, антитело было визуализировать на 5-бром-4-хлор-3-индолил фосфат / Nitro Blue тетразолия (BCIP / НБТ; KPL, Gaithersburg, MD) и пятна насчитывалось помощью вскрытия микроскоп (Zeiss, Оберкохен, Германия) . Представлены числа IFNγ секретирующих клеток на 105 эффекторных клеток с поправкой на фоновом уровне учитывается в отсутствие клетки-мишени, которая обычно составляет от 10 до 20 spots/105 клеток. Клетки-мишени без эффекторных клеток показали не фонового уровня.

Лактатдегидрогеназа цитотоксический
Колориметрический CytoTox одной однородной мембраны Integrity Assay (Promega, Мэдисон, Висконсин) был использован оценке лактатдегидрогеназы (ЛДГ) освобождение от лизис клеток. Опыты проводились в соответствии с протоколом производителя. Литической активности лимфоцитов из мезентериальных лимфатических узлов против клеток-мишеней (Panc02, EL4, CMT-93, MC3T3-E1 и PBMCs) была измерена ночь после инкубации при Effector: клетки-мишени отношением 30:1. Максимальный ЛДГ освобождении была достигнута при инкубации клеток-мишеней с помощью прилагаемого лизис буфера. Клетки-мишени без эффекторных клеток, были использованы в качестве негативного контроля. Флуоресценции, измеренных на Cytofluor 2300 (Millipore, EX / EM: 530/620 нм). Цитотоксичность рассчитывается по следующей формуле:% цитотоксичность = 100 × (экспериментальный релиз - спонтанное освобождение эффекторных клеток - спонтанное освобождение клеток-мишеней) / (максимальный ЛДГ релиз - спонтанно-релиз (негативный контроль) клеток-мишеней).21 22

Bio-Plex Белки Array система
Группа цитокинов сыворотки крови измерялся в двух экземплярах помощью Bio-Plex Белки Array системы (BioRad, Мюнхен, Германия), в соответствии с инструкциями производителя. С Bio-Plex цитокинов комплекта анализа в сочетании с Bio-Plex Manager, сыворотка IFNγ, фактора некроза опухоли α (TNFα), интерлейкин (IL) 3, IL5, IL6, гранулоциты-макрофаг колонии-стимулирующий фактор (GM-CSF ) и колоний гранулоцитов стимулирующего фактора (Г-КСФ) оцениваются на протяжении всего времени ходе инфекции. Значения соответствующие уровни цитокинов сыворотки необработанной контрольных мышей набор 1, а все остальные данные, переданные в виде X-кратное увеличение.

Статистика
Все значения выражаются в виде среднего (SEM). Поскольку ни одно существенное различие было измерено в любом из оценки параметров между транспортным средством обращению животных и опухоль-переноски и М49-инфицированных опухолей, свободных мыши в различные моменты времени, данные только из одной временной точке (день 28, N = 6) были приняты для графического представления и статистическая оценка. Данные из необработанных контрольных животных (N = 3) служит физиологической ценности и отображаемые в графиках, однако они не были рассмотрены для статистического анализа между группами. Аналогичным образом, опухоль, свободные S pyogenes-инфицированные животные служили только в качестве внутреннего контроля за бактериальной инфекции. Оказавшись предположения о нормальности и равной дисперсии, сравнений между группами были проведены с использованием дисперсионного анализа (ANOVA), а затем соответствующий постфактум сравнения теста (SigmaStat, Jandel корпорации "Сан-Рафаэль, Калифорния). Критерий значимости принимался равным р <0,05.

Предыдущий разделСледующий раздел
РЕЗУЛЬТАТЫ
Выбор бактериального штамма и дозы инфекции
Во-первых, мы исследовали влияние различных S pyogenes Нагрузка на Panc02 клеток поджелудочной железы рак IN VITRO (кратность инфекции (МВД) = 25)). Большинство штаммов не посредниками значительное торможение роста или убийство деятельности. Однако активности каспазы 3 испытания и суб-G1 пике анализ показал, что S pyogenes серотип М49 штаммом 591 оказывали серьезное цитотоксических реактивность, что наиболее вероятно, связано с индукцией апоптоза клеток поджелудочной железы к раком мышиной (Panc02) и человеческого (Panc1, BxPC3, Capan2) происхождения (Рис 1 и данные не представлены). Следовательно, S pyogenes серотип М49 штаммом 591 был выбран для оценки бактериолитический antitumoural терапии в VIVO. Бактерии были применены intratumourally максимизировать местных antitumoural воздействия и минимизации возможных системных цитотоксичность.


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 1 Количественный анализ апоптоза. (А) увеличение активности каспазы 3 в Panc02 клеток после заражения S pyogenes М49 дикого типа (WT), ориентировочный для индукции апоптоза, что было подтверждено (B) цитофлуориметрического суб-G1 анализ пика. Клеток с содержанием ДНК ниже G1 пике считались апоптозу. Результаты показывают данные из трех отдельных экспериментах. (C) Panc02 клетки показывают характерное суб-G1 пики на 4 ч постинфекционные (представительных результатов из трех независимых экспериментов). Средние (СЭМ); * P <0,05 по сравнению с контролем; ** P <0,001 по сравнению с контролем, рассчитанная на основе анализа дисперсий.
Далее, мы стремились оценить оптимальное терапевтическое, нетоксичны числа инфекций. Увеличивается количество бактерий вводили (105, 106 и 107 КОЕ / мл). Животные группой, получавшей высокие дозы бактериальных стремительно развились серьезные признаки системной инфекции и умер (Рис 2). В противоположность этому, только два животных (15%) умерли от администрации S pyogenes в среднем (106 КОЕ / мл) и низким (105 КОЕ / мл) бактериальной дозах, соответственно, еще 4 недели постинфекционные. Для IN VIVO применения, высокая допустимая доза была выбрана (106 КОЕ / мл).


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 2 Кривая выживаемости мышей с C57Bl/6N гетеротопической сингенных поджелудочной железы. После создания опухоли мыши получали одну инъекцию intratumoural S pyogenes и контролировалась в течение 28 дней с соблюдением этических требований. Для оценки оптимальных терапевтических дозах, бактерии вводились в трех различных дозах. Эксперимент как минимум пять мыши на каждую группу.
Валовая выводов после заражения S pyogenes
Intratumoural администрация S pyogenes не влияет на рост рак поджелудочной железы в течение первых 4 дней. Ощутимыми опухоли продолжали расти и достигли среднего размера 128,6 (11,8) мм3), Которая была сопоставима с размерами опухоли транспортного средства обращению животные (151,9 (11,8) мм3). Затем, примерно 6-8 дней после заражения, опухолей в группе инфекций заметно и количественно меньше, чем у контрольной группы (р <0,05 по сравнению с контролем и транспортных средств; Рис 3) И нередко язвенная и, видимо, necrotised 10-14 дней после инфицирования (Рис 3). Это в конце концов привели к почти полной регрессии в течение 4 недель.


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 3 Кинетики роста опухолей у животных на 7, 14, 21 и 28 дней после intratumoural бактериальные инфекции и после rechallenge. Животные получали tumourigenic доза Panc02 клеток. Naïve М49-C животные были использованы в качестве контроля. Мыши, которые произошли бактериолитический терапии были частично защищены от повторного воздействия Panc02 клеток. Средние (СЭМ); * P <0,05 против опухоли; † Р <0,05 против транспортного средства; § р <0,05 против М49-C rechallenge, рассчитанная на основе анализа дисперсий.
Проанализировать частоту системной распространения S pyogenesМы никелированная образцы крови у всех зараженных животных на данный момент точек на овец кровяной агар, выявление системных бактериальные инфекции у 2 из 28 несущих опухоли мышей и ни в одном из 12 опухолей, свободных, животные М49 контроля. Два системных инфицированными животными отображается отсутствие аппетита, потеря веса и атаксии. Из-за тяжести инфекции, эти животные были euthanised и сопутствующих данных исключена.

После периода наблюдения (1, 2, 3 и 4 недели), были принесены в жертву животных. Макроскопическое исследование органов показали никаких побочных эффектов, таких как некроз или кровоизлияние, но не было массовых спленомегалия лишь в несущих опухоли мышей, которые подверглись бактериолитический терапии (примерно семь-восемь раз для увеличения размера на всех временных точках, данные не представлены). Интересно, селезенке опухолей, свободных мышей, инфицированных S pyogenes Макроскопически не были увеличены.

Аналогичным образом, в день 14 постинфекционные, животных в группе лечения исключительно выставлены переходных лейкоцитов (р <0,05 по сравнению с контролем и транспортных группах, соответственно), а также устойчивым падением уровня гематокрита (р <0,05 по сравнению с контролем, и транспортное средство) (Таблица 1). Устойчивый низкого уровня гематокрита отрицательно коррелировала с размерами селезенки.23 В этом случае, снижение гематокрита может свидетельствовать о расширении объемов лейкозом.

Просмотр этой таблице:
В этом окне
В новом окне
Таблица 1 Системный анализ крови клеток и гематокрита в контрольных группах (контроль, М49-C, опухоли, транспортного средства) и 7, 14, 21 и 28 дней после S pyogenes инфекция
Опухоль rechallenge демонстрирует лишь частичную защиту
Чтобы проверить, в какой степени бактериолитический терапия привела не только к регрессии опухоли, а также индуцированные защитные иммунологические к памяти повторного воздействия Panc02 клеток опухоли, был проведен эксперимент rechallenge опухоли. Группа состояла из животных, опухоли, свободных после лечения и наивно М49-C мышей. Оба получили tumourigenic доза Panc02 клеток в противоположном фланге. Через четыре недели после инокуляции опухоли, М49-C мыши отображается растущие опухоли (889,5 (245,7) мм3) (Рис 3). В rechallenge группе, развитие опухолей был значительно задержан (226,6 (71,3) мм3, Р <0,05) (Рис 3), С одного животного оставшиеся опухоль бесплатно до конца эксперимента. Взятые вместе, это означает, что терапия с использованием бактериолитический М49 мощным связующим звеном antitumoural реактивности VIVO. Однако только один из шести животных был полностью защищен от повторного контакта с Panc02 опухолевых клеток.

Проникновение лейкоцитов в опухоли следующие intratumoural инъекций S pyogenes
Чтобы оценить степень лейкоцитарной инфильтрации в качестве меры реагирования местных antitumoural после заражения S pyogenes, Опухолевые ткани были впервые изучены гистологии CAE (Рис 4). Эти эксперименты показали, в соответствии с системными лейкоцитоз, положительная окраска отдельных лейкоцитов, с наивысшими значениями на 7 дней и 14 после бактериальные инфекции (р <0,05 по сравнению с контролем и транспортных средств, Рис 4C), Но значения остаются по меньшей мере в три раза выше, чем у контрольных животных.


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 4 Представитель изображений лейкоцитарной инфильтрацией тканей поджелудочной транспортного средства после лечения (А) или в день 7 (б) после S pyogenes инфекции. (C) Количественный анализ хлорацетат эстераза (CAE)-положительных лейкоциты проникают в ткани опухоли. Данные из контрольной группы являются репрезентативными для других точек времени (Original увеличение, × 40). Средние (СЭМ); * P <0,05 против опухоли; † Р <0,05 против транспортного средства, рассчитанные на основе анализа дисперсий.
Как показано в Рис 5, Большинство из этих проникающих клетки гранулоцитов (CD88-положительных) и CD4+ Т-клетки, в то время цитотоксических Т-клеток (CD8-положительных) оказались заметно в некротической регионов опухоли (Рис 5). Кроме того, воспалительными клетками были обнаружены лишь в редких случаях в контроле опухоли, и среди них не было CD4+ или CD8+ Т-клеток и CD88+ гранулоцитов.


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 5 Представитель изображений CD4, CD8 и CD88 иммуногистохимическое окрашивание тканей опухоли поджелудочной железы после транспортное средство лечения (A, D, G) или в день 7 (B, E, H) и День 21 (C, F, I), после S pyogenes инфекции (106 КОЕ / мл, n = 7 в момент времени). Обратите внимание на массовое накопление CD4-положительные Т-хелперов и гранулоцитов в рамках бактериально инфицированной опухолевой ткани (в оригинале увеличение, × 40).
Определение спленоцитов подмножеств цитофлуориметрического анализ
Далее, мы проанализировали состав иммунных клеток селезенки (Таблица 2). Мы наблюдали высота макрофаги и моноциты (CD11b+), А также пожилые гранулоцитов (Gr1+) В течение первых 2 недель после заражения (Таблица 2). Количество трансферрин рецептор-позитивные (CD71) клетки были существенно подняты, тогда как выражение L-селектин (CD62L) постепенно downregulated. Уровень CD4+ (Т-хелперы), CD8+ (цитотоксические) и CD25+ Т-клеток были слегка повышенной в течение первых 3 недель постинфекционные (Таблица 2). Тем не менее, резкое снижение числа CD4+ а также CD8+ Т-клеток в день 28 отражено возможности миграции иммунологических эффекторных клеток больше в лимфоидной ткани, чем в селезенке.

Просмотр этой таблице:
В этом окне
В новом окне
Таблица 2 Анализ спленоцитов подмножества в контрольных группах (контроль, М49-C, опухоли, транспортного средства) и 7, 14, 21 и 28 дней после S pyogenes инфекции (%)
Изменения уровня цитокинов в результате инфекции
Данные, описанные выше указанных воспалительные реакции в тканях опухоли М49 обращению животных. Таким образом, мы интересуется, может ли системный эффект может быть измерена в дополнение к этим местным явлением. Сывороточные уровни цитокинов были определены от инфицированных и не инфицированных животных. Анализ хемотаксис нейтрофилов полипептидных Г-КСФ показали 158,5 (33,8) и 21,1 (4,6) увеличения на 3 дня и 7, соответственно, после S pyogenes лечения по сравнению с контрольными значениями (р <0,001, Рис 6). Кроме того, мы обнаружили значительное увеличение для IFNγ и IL3 на 7 дней, с возвращением в ближайшее-физиологических значений всех трех Th1 цитокинов в более поздние моменты времени (Таблица 3), Что свидетельствует о сильном провоспалительных стимулов, особенно в ранних стадиях S pyogenes инфекции. Аналогичная картина была видна TNFα (Таблица 3). На 14 день, S pyogenes инфекция, возникающая в пять раз увеличить IL5 и 15-кратное увеличение IL6, а затем троекратное увеличение ГМ-КСФ уровнях на 21 дня (Таблица 3).


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 6 Кинетика цитокинов колоний гранулоцитов стимулирующего фактора (Г-КСФ) в ходе экспериментального ход времени. Животные, которые были инфицированы intratumourally с S pyogenes показали огромное увеличение Г-КСФ на 3-й день после лечения, в то время никаких существенных различий были измерены в контрольных животных. Результаты показывают данные из трех мышей в момент времени. Средние (СЭМ); * P <0,05 против опухоли; † Р <0,05 против транспортного средства, рассчитанные на основе анализа дисперсий.
Просмотр этой таблице:
В этом окне
В новом окне
Таблица 3 Сыворотка цитокинов деятельности в контрольных группах (контроль, М49-C, опухоли, транспортного средства) и 7, 14, 21 и 28 дней после S pyogenes инфекция
Лимфоциты инфицированных животных конкретно признать опухолевых клеток
Далее мы рассмотрели ли иммунных клеток реагировать на раздражение от опухолевых клеток. Во-первых, реакция сотрудничество спленоцитов-инкубировали ночь с различной целевой популяции клеток была измерена в IFNγ-ELISPOT анализов. Panc02 клеток опухоли вызвало IFNγ релиз исключительно в спленоцитов получены от М49 обращению животных. Однако эта реакция была статистически значимы только в день 14 постинфекционные (р <0,05 по сравнению с контролем и транспортных средств; Рис 7A). Интересно, что аналогичные результаты были получены с другими сингенных опухоли клеточных линий, таких как линия лимфома EL4 клетки и клетки колоректальный рак CMT-93 (Рис 7A). Далее мы определяли активность спленоцитов животных, не являющихся раковые клеточные линии контроля, чтобы исключить неспецифическую реакцию. Что касается IFNγ релиза, ни одна из лейкоцитов показал реактивностью против сингенных MC3T3-E1 фибробласты или PBMCs (Рис 7B).


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 7 Количественный анализ интерферона (IFN) γ-ELISPOT анализа. Реактивность спленоцитов против опухоли целью была испытана после совместной инкубации в течение ночи при Effector: клетки-мишени отношением 30:1. СПЛЕНОЦИТАХ от инфицированных животных на 7, 14, 21 и 28 дней после intratumoural бактериальные инфекции показали значительно более высокую реактивность против клеток-мишеней, чем те, от контрольных животных (28 день). Данные из контрольной группы являются репрезентативными для других точек времени. Удивительно, что реакционная спленоцитов против Panc02, EL4 и CMT-93 клеток (A) сократился с 7 дней до 28 после заражения. Кроме того, лимфоциты показал не реакционный против MC3T3-E1 фибробласты или мононуклеарных клеток периферической крови (PBMCs) (B) во время периода инфекции, подчеркивая опухолевую клетку конкретной деятельности. Результаты показывают данные из трех отдельных экспериментах. Средние (СЭМ); * P <0,05 против опухоли; † Р <0,05 против транспортного средства, рассчитанные на основе анализа дисперсий.
В более функциональных анализов цитотоксичность, мы использовали лимфоциты получены из лимфатических узлов эффекторных клеток. Опять же, лимфоциты S pyogenes-мышей признана Panc02 опухолевые клетки, лимфоциты, но из-под контроля животных не показывают литической активности. Следует отметить, что убийство активность лимфоцитов от опухоли-инфицированных постоянно увеличивается группа постинфекционные (р <0,05 по сравнению с контролем и транспортных средств; Рис 8A). Кроме того, другие сингенных клеточных линиях опухоли (EL4 и CMT-93) было также эффективно лизировали (Рис 8A). Опухоль специфики могут быть подтверждены отсутствует или маргинальных цитотоксичности против не раковые клетки контроля (MC3T3-E1 и PBMCs) (Рис 8B). Таким образом, признание опухолевых клеток в предыдущих экспериментах, и предлагаются конкретные индукции специфического иммунного ответа, что способствует наблюдается регресс опухоли S pyogenes-инфицированными животными.


Просмотр увеличенной версии:
В новом окне
Скачать как слайдов PowerPoint
Рисунок 8 Количественный анализ цитотоксичности помощью лактатдегидрогеназы анализа освобождении. Лимфоциты были изолированы от брыжеечных лимфатических узлов и сотрудничества с культурными целями в течение 24 ч при Effector: клетки-мишени отношением 30:1. Лимфоциты от инфицированных животных на 7, 14, 21 и 28 дней после intratumoural бактериальные инфекции показали значительно более высокой литической активности против клеток-мишеней, чем те, от контрольных животных (28 день). Цитотоксичности лимфоцитов против (А) Panc02, EL4 и CMT-93 клеток увеличилось с 7 дней до 28 после инфицирования, до> 50%. В отличие от этого, не литической активности лимфоцитов против (б) не раковая MC3T3-E1 был замечен клеток или мононуклеарных клеток периферической крови (PBMCs). Данные из контрольной группы являются репрезентативными для других точек времени. Результаты показывают данные из трех отдельных экспериментах. Средние (СЭМ); * P <0,05 против опухоли; † Р <0,05 против транспортного средства, рассчитанные на основе анализа дисперсий.
Предыдущий разделСледующий раздел
ОБСУЖДЕНИЕ
Учитывая неблагоприятный прогноз пациентов с поздними стадиями рака поджелудочной железы и неудовлетворительным результатам стандартных терапевтических вмешательств, развиваются новые стратегии лечения является императивом. Таким образом, мы изучили antitumoural потенциал бактериолитический терапии, основанной на факультативных анаэробных бактерий. Мы выбрали S pyogenes в качестве модели бактериальный штамм, потому что это может оказать прямое воздействие на цитолитический эукариотических клеток,24 25 опосредованная различными цитотоксических ферментов и порообразующих токсинов.26 27 Среди них haemolysins стрептолизин S и стрептолизином О, кажется, играют ключевую роль.25 28 29 В ходе предварительных расследований в VITRO, мы обнаружили, что S pyogenes Действительно посредничает поджелудочной серьезные повреждения клеток карциномы (неопубликованные данные). Другая причина для использования S pyogenes является исключительная чувствительность стрептококков к пенициллину, который позволяет легко искоренение следующих терапевтического применения.17 В качестве модели поджелудочной железы, мы избрали агрессивно растет, плохо иммуногенной модель мыши Panc02.18 Эти опухоли показать внутреннюю нечувствительность к противоопухолевых агентов.18 30--32

Есть важных и актуальных особенностей, общих для инфицирования S pyogenes у мышей и человека инфекции: (1) быстрое повреждение клеток после инфицирования, сопровождается изъязвления и некроз тканей зараженных; (2) значительный и устойчивый высота провоспалительных цитокинов (TNFα, IFNγ) и хемокинов (Г-КСФ), (3 ) высокий приток воспалительными клетками иммунной системы (например, нейтрофилы, макрофаги и ЕК-клетки) в фокус-инфекции; и (4) активизация адаптивных, клеточный иммунный ответ.16 33--35 Кроме того, внутривенное введение живых бактерий вызывает сильную токсичность.25 36 Учитывая эти факты и ранее упомянутые требования для прямого бактериальных и опухолевой клетки контакт, мы сосредоточились на местном, intratumoural инъекции, а не на системные приложения.

Заметным результатом нынешних экспериментов было полной регрессии опухоли в течение 4 недель после intratumoural Администрации жить S pyogenes. Это antitumoural эффекта предлагает активное участие в руке врожденной иммунной системы. В поддержку этого толкования, было установлено, что в ходе начального этапа S pyogenes инфекции, врожденных иммунных клеток, то есть, гранулоциты, моноциты-макрофаги, и являются основными эффекторы ответивших на работу в месте инфекции.9 28 33 34 Наши наблюдения решительно выступает за текущий воспалительный ответ: Эти замечания относятся гранулоциты (CD88-положительных), которые массово проникнуть инфицированы опухолей; значительное увеличение селезенки гранулоцитов и моноцитов и макрофагов (CD11b-положительных), а также системные производство провоспалительных цитокинов, таких как IL3, IFNγ и TNFα. Основная цель этого воспалительного ответа является предотвращение системного распространения бактерий,9 главным образом весьма эффективными фагоцитарную активность мышиных макрофагов, которые особенно способным убить стрептококков.28 36

IN VITRO функционального анализа показали, что специфического иммунного ответа в условиях IFNγ релиз был ограничен иммунных клеток, полученных от бактерий М49-лечение опухолевых животных. Этот вывод дополнительно поддерживается потенциальных лимфоцитов к клеткам признать Panc02 в цитотоксичности. Опухоль была специфика далее подчеркнули, из-за отсутствия реактивности к не-раковые клетки контроля. Интересно отметить, что мы также наблюдается перекрестных реакций этих клеток лимфоцитов с другими лицами сингенных опухоль, возможно, объясняется наличием общих лимфоцитов признании опухолевых антигенов.

Чтобы объяснить нашим данным, мы предлагаем следующую модель. Intratumourally ведении S pyogenes вызывать инфильтрацию воспалительных клеток из периферической крови в зараженных тканях,29 37 где они занимают инфицированные клетки, чтобы очистить бактериальной инфекции. В крылом лимфатические узлы, компоненты клеточной мусора представлены другие иммунные клетки. В результате продолжающегося воспаления и активированного статус представляющие клетки, специфические иммунные реакции легко может быть возбуждено. Вполне возможно, что в этом контексте, опухоль-специфической иммунной реакции также срабатывает.37 Следовательно, животные, по крайней мере частично защищена от опухоли rechallenge. Однако частичный характер этого защитного иммунитета дальнейшие намеки на необходимость сильного воспалительного стимулов к искоренению опухоли бремя полностью.

Насколько нам известно, мы являемся первыми, чтобы показать, что S pyogenes Первоначально инфекция активизирует иммунную систему и приводит к генерации опухоли конкретного эффекторных клеток, способствуя регрессии поджелудочной железы. Это предположение подкрепляется выводами других групп, которые использовали инактивированный S pyogenes подготовка (ОК-432) для лечения некоторых типов экспериментальных опухолей. Полезность ОК-432 в VIVO созревание дендритных клеток, приводя к индукции устные опухоли конкретного цитотоксических Т-лимфоцитов в сочетании с применением химиотерапевтических агентов не было продемонстрировано.38 Кроме того, Ono и др. доказали полезность ОК-432 как вспомогательное вакцинации в сочетании с опухолью конкретного эпитопом Т-клеток.39 Вопреки нашим выводам с помощью одного intratumoural инъекции живых бактерий, экспериментальные опухоли бывшего исследования не полностью регресс после терапии. Впечатляющие опухоль ставок искоренение аналогичных тем, которые наблюдались нами были, однако, сообщили Avogadri и др. использование ослабленных Сальмонелла.37 Интересно, что высокая реакционная antitumoural строго зависит от расширенный репертуар Сальмонеллаконкретные Т-клетки проделанной prevaccination протокола.

Взятые вместе, мы показали, что иммунотерапия бактериолитический помощью факультативных анаэробных бактерий, таких как S pyogenes является перспективной новой стратегии для лечения поздних стадий рака поджелудочной железы, которая требует дальнейшего изучения.

Предыдущий разделСледующий раздел
Благодарности
Мы благодарим д-р Крюгер B для обеспечения доступа к Cytofluor 2300.

http://gut.bmj.com/content/57/4/483.full

Расшифровка генома рака


Ученым из Великобритании удалось расшифровать геном легких и рак кожи. По словам исследователей, это создаст лучшие способы лечения и предупреждения


Новые научные открытия в Великобритании расшифровали полный геном кожи и рак легких. Согласно исследованиям, проведенным Wellcome Trust Sanger Институте в Англии, 23000 были обнаружены мутации в ДНК от рака легких, который раскроет все генетические дефекты, которые вызывают эти заболевания.

В связи с легкого, научные исследования показали, что 23000 мутации в их ДНК были вызваны главным образом в результате воздействия дыма табака. В то же время претензии, что генетический дефект, который вызывает это заболевание вызывается за каждые 15 сигарет, выкуренных типичный курильщик.

Что касается меланомы, ученые обнаружили, что геном этого заболевания имеет более чем 30000 дефекты, почти все они вызваны чрезмерным воздействием ВС

Значительные исследования по раку также проводят и в других странах, где различные группы ученых, работающих на геном другие виды рака, например, в Японии в связи с раком печени в Индии, в рот, в Китае живот и в Соединенных Штатах от мозга, яичников и поджелудочной железы.

Открытия


В частности, исследование позволило выявить, что рак является болезнью многие гены и внешние факторы, приобретенных длительный срок службы таких как табак, ультрафиолетовое излучение или алкоголя, повреждение ДНК, причина, в результате чего клетки размножаются бесконтрольно.

По словам исследователей, эти данные помогают установить более четкое моделей для выявления заболевания и разработать новые стратегии, чтобы рассматривать его персональной.

Это создаст новые альтернативы для лечения использовался в течение десятилетий, как правило, еще на трех стратегиях: операция по удалению опухоли, лучевая терапия, химиотерапия, чтобы сжечь ее, чтобы уничтожить его.

Профессор Майк Stratton, который возглавлял исследования в Wellcome Trust Sanger Институт считает, что "в течение десятилетия или более" карт генетические мутации являются обычной практикой в клинике, и сказал: "эти каталоги мутации Расскажите нам, как он разработал рак, и, следовательно, также может рассказать нам о том, как лучше предотвратить ".

Известно, что генетические мутации, которые приводят к раку лет до опухоли становится очевидной.

Эти события указывают на то, что будущие медицинские работники могут обнаружить, почему, когда и каким образом они образуют опухоль, которая позволила бы подход и специфического лечения для каждого пациента.

Stratton сказал, что эти генетические карты "Расскажи нам, что процессы, которые нарушили клеток, а также с информацией, что сейчас мы можем прервать эти процессы через методы лечения". В этой связи он заявил, что "это очень важный момент в истории исследования рака.

http://www.diariohoy.net/accion-verNota-id-60253-titulo-Descifran_el_genoma_del_c%C3%A1ncer

Канадские ученые обнаружили, что человеческий организм сам может предотвратить рак
Канадские ученые нашли белки уже присутствуют в живых организмах, включая человека, могли бы предотвратить неконтролируемое деление клеток, которые вызывают некоторые виды рака. В исследовании, проведенном университетами и Шербрук Монреаль, Канада, объясняет, что SOCS1 молекулы могут предотвратить гиперактивность цитокинов, гормонов, ответственных за хронического воспаления типичны такие заболевания, как рак легких и желудка.


По BBC News на 14 декабря 2009




"Мы обнаружили, что SOCS1 белка получает сигналы от ситуации хронического воспаления и активирует клеточные программу, заставляющую клетки вместо продвижения к неконтролируемое деление которая характеризует рак, входя покоя (скрытая), которая позволяет им начать деления и, следовательно, не может стать раковыми клетками ", сказал он BBC World Ferbeyre Жерар, автор исследования.

Хронические болезни

Исследований, опубликованном в пятницу в журнале Molecular Cell, может помочь разработать стратегию по профилактике онкологических заболеваний у людей, страдающих хроническими заболеваниями, которые могут быть особенно полезны для тех, пострадавших от асбеста или нюхательного табака, по мнению авторов .

Рак связаны с воспалением наиболее затрагивающих людей сегодня, согласно докладу. Например, рак легких, который является наиболее распространенным будет вызвано воспаление, вызванное табак и другие раздражители.

Или желудка, вызванные едят горячие блюда. Кроме того, авторы исследования считают, что рак предстательной железы может также иметь хронический воспалительный компонент.

Создание белка

"Молекула SOCS1 происходит во всем теле человека, но обычно в очень малых количествах (...) У людей с онкологическими заболеваниями, около трети из них умирают, потому что эти естественные защитные не работает хорошо" сказал Ferbeyre.

"В этих случаях SOCS1 теряется по нескольким причинам, в том числе изменений, которые происходят в ДНК, которые делают молекулу не происходит", добавил он.

Поэтому следующим шагом этого исследования будут сосредоточены на возрождении его производства. Ученые надеются использовать лекарственные средства для этой цели, используя химический процесс, который влияет на ген, ответственный за рождение SOCS1.

Однако, трудно на эти лекарственные средства работы в краткосрочной перспективе. "Процесс перевода фундаментальных исследований в клиническую результат долгого процесса", сказал Ferbeyre.

"Это, в лучшем случае за последние десять лет", сказал он.

Источник: BBC News

Е.А.

http://informe21.com/cancer/cientificos-canadienses-descubrieron-propio-cuerpo-humano-podria-prevenir-cancer

Сочетание двух препаратов распространяется жизни для женщин с раком груди
Издается в 10:15 утра на 15 декабря, 2009 | Carabobeño



У некоторых женщин с раком молочной железы, которые больше не реагируют на определенные лекарства могут продлить свою жизнь с помощью комбинации двух препаратов, сообщили о нескольких специалистов.

Врачи первой изучалось влияние комбинации Герцептина и Tykerb в анализ 300 пациентов. Женщины, которые приняли оба препарата жил почти пять месяцев дольше, чем те, кто только взял Tykerb.

Врачи ожидают еще больше льгот для женщин, страдающих от болезни, не столь значительным, и было приподнятым, чтобы увидеть значительные улучшения в женщин, которые сталкиваются с неминуемой смертью.

"Мы видим, что многие методы работы с пациентами, которые испытали шести предыдущих терапии, как мы сделали с этим исследованием, так что это достижение является захватывающим," сказал д-ра Дженнифер Литтон, специалист рака груди на MD Андерсон Рак центра университета Техаса.

Хорошие результаты отличие от двух других исследований было установлено никаких шансов на выживание с Авастин, наркотиков, утвержденных для пациентов, у которых рак молочной железы был очень спорный. Два ежемесячных вливаний Авастин, который в ней нуждается, может стоить до $ 30000. Его создатель, Genentech, заявил, что оптовые цены это плата за наркотиками $ 7700 в месяц.

Герцептин и Tykerb сосредоточены на лечении белок под названием HER-2, который появляется в огромных количествах примерно в одной четверти женщин, страдающих раком молочной железы. Герцептин блоки белков на поверхности клетки, Tykerb и делает это внутри клетки.

"Это как двойной проверки в опухоль. Если первый сбой, второй работает", сказал доктор Kimberly Blackwell из Университета Дюка и руководитель исследования.
http://www.entornointeligente.com/resumen/resumen.php?items=993493