Инфекционный эндокардит в связи с Streptococcus Bovis у пациентов с раком толстой кишки





Александр Maulaz Барселуш; Марко Антонио Тейшейра; Lidianny Силва Алвес, Марсело Виейра Антунес; Маркуса Лима затемнять; Noely А. Рибейро

Больницы Сан-Жозе-ду-Аваи, Itaperuna, RJ - Бразилия

Почтовый адрес





РЕЗЮМЕ

Мы сообщаем о случае 66-летняя женщина пациента с инфекционным эндокардитом за Streptococcus Bovis и аденокарциномы толстой кишки, что развилась острая недостаточность аорты. Она была представлена ​​аортальной хирургии замены клапана, а затем в резекции опухоли (справа гемиколэктомия). Важно подчеркнуть необходимость дополнения исследование толстой кишки, даже у бессимптомных лиц, когда инфекционный эндокардит из-за С. Bovis диагноз.

Ключевые слова: бактериальный эндокардит; аденокарцинома; Streptococcus Bovis ; аортальной недостаточности клапана.





Введение

Streptococcus Bovis это микроорганизм, который колонизирует человека желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и находится на 2,5% до 15% людей. Это группы D Streptococcus бактерии , которые могут вызывать бактериемии и эндокардита, а также инфекции мочевыводящих путей и септический артрит и другие. На его долю приходится примерно 14% инфекция вызывает и 13% всех случаев инфекционного эндокардита (ИЭ) 1,2 .

Иногда IE вызванных S. Bovis связан с колоректальным раком. Эта ассоциация была впервые описана в 1951 году Маккой и Мейсон, но это было только в 1977 году, что было признано в клинической практике и его патогенезе прежнему требуют выяснения 1,2 .

Целью настоящего исследования является отчет случае IE из-за С. Bovis связано с колоректальным раком, обсуждая эпидемиологических, клинических, диагностических и терапевтических аспектах.



История болезни

66-летняя женщина диабетической и гипертонической пациента, из города Italva, штат Рио-де-Жанейро, Бразилия, был принят в реанимационное отделение HSJA / Itaperuna, в марте 2008 года, с острым респираторным I. После неудачи типа стабилизируется, она была передана в кардиологии больницу для проведения расследования.

В то время, она сообщила, картина на усталость напряжения за предыдущие три года, а ухудшение ситуации на месяц до госпитализации, связанных с лихорадочных эпизодов (не пристрастие к времени суток), тошнота и обобщенные артралгия. На физическое обследование, пациент лихорадочных, бледная (+ / 4 +), представленная диастолический шум с аортальной фокус и аорты аксессуар (+++/ 4 +), а также легочных потрескивания. Остальная часть физического обследования было нормально. Лабораторная оценка: гемоглобин = 11г/дЛ, гематокрит = 32%, hemosedimentation скорости (ВПГ) = 120 мм. Рентген грудной клетки показал расширение сердечной области. Эхокардиография показала несколько увеличилась левое предсердие и желудочек. Давление в легочной артерии составило 42 мм рт. Аортальный клапан был утолщен, с острием фрагмент проектирования до LVOT (слева тракта оттока желудочка) в диастолу. Она представила небольшой ИМ и значительное AI. Левого желудочка (ЛЖ) систолической функции был сохранен. Чреспищеводной эхокардиографии ( рис. 1 ) раскрыты Л. А. (3,2 см), Л. В. (3,4 см), Л. В. индексироваться масса = F191.63 г (нормальная до 276 г), ФВ ЛЖ (ФВ ЛЖ) = 69,13%. Л. В. представила гипердинамического стены совместимы с острыми, вероятно, объем перегрузки. Трехстворчатого аортального клапана представлена ​​растительность придерживался левой коронарной острием, движется в направлении LVOT, около 12,3 мм в расширение. Посев крови подтвердили гипотезу инфекционного эндокардита вызванные группы D Streptococcus Bovis .








Терапия с помощью кристаллического пенициллина и амикацина была начата еще до результате посев крови не было. В последующие дни пациент надлежащей клинической эволюции изображения и улучшения симптомов без лихорадки. Она получила амикацина в течение 14 дней и пенициллина в течение 28 дней.

Колоноскопии была проведена, которая раскрывается присутствие сидячие полипы в толстой кишке и поперечный плоскости опухоли в печеночной углом ( рис. 2 ). Гистопатологические анализа показали, что это хорошо дифференцированных и проникновения аденокарциномы.








После окончания антибиотикотерапии, новые эхокардиограмма контроль показал сохранение серьезного провала аорты и пациент был направлен к аортальной хирургии замены клапана. Хирургическая процедура была без осложнений, и пациент благоприятный послеоперационный эволюции, что позволило ей выписки из стационара на 6 -й день после операции. Клапан культуры был отрицательным.

Два месяца спустя правой гемиколэктомия была выполнена, и она была выписана на 4 -й день после операции.



Обсуждение

Инфекционный эндокардит является заболеванием, при котором микроорганизмы проникают в поверхность эндокарда, вызывая воспаление и травмы. Его заболеваемости остается стабильным, около 1,7 до 6,2 случаев на 100 тысяч физических лиц. Мужчины, как правило, больше пострадавших, чем женщины (1,7:1), однако, возраст пострадавших лиц увеличился с 30-40 лет в доантибиотическую эры до 47-69 в последние годы. В развитых странах, дегенеративные изменения и клапанных протезов, и больше не ревматизм, являются наиболее важными предрасполагающими факторами для возникновения эндокардита 1,3,4 .

С. Bovis является важной причиной бактериемии и инфекционного эндокардита у взрослых 5 . Он представляет с 7% до 14% случаев подострого эндокардита и часто ассоциируется с толстой неоплазии. Частота этого объединения составляет около 18% до 62% 4 . Неоплазии толстой могут появиться спустя годы после инфекционных события.

Эндокардит по С. Bovis обычно поражает больных старше 60 лет и имеет пристрастие к аортального клапана. Основным осложнением является застойная сердечная недостаточность. Более того, она часто сопровождается клапанной абсцессов и системных тромбоэмболии 2,5 .

Клинически, нет Характерно, что отличает эндокардит по С. Bovis с другой этиологии; лихорадка наблюдается практически во всех пациентов.

Диагноз инфекционного эндокардита основывается на критериях князя, которые были впоследствии изменены 6,7 . Трансторакальной эхокардиографии (TTE) является быстрым и неинвазивным и имеет отличную специфичность для диагностики эндокардита (98%), однако она имеет общую чувствительность только 40-60%. Чреспищеводной эхокардиографии (TEE) является менее доступной и более дорогой способ, но он представляет высокая чувствительность (от 75% до 95%) и специфичность (от 85% до 98%) 5 . Это особенно полезно у пациентов, которые клапанных протезов и в оценке эндокардит осложнений. 2005 Руководящие принципы АКК и AHA предположил, что TTE должны быть использованы в оценке родной клапанов у пациентов с хорошим изображения, тогда как наличие протеза или любых других обстоятельств, которые препятствуют эхокардиографические окном обычно требует использования TEE 4 .

Сопутствующее возникновения бактериального эндокардита и толстой рак был впервые описан в 1951 году, по Маккой и Мейсон 7 . Однако только в 1977 году С. Bovis был признан Кляйн и др. 8 , так как возбудитель этой неоплазии 2 . Хотя многие авторы сообщали, на протяжении многих лет, связь между несколькими типами возбудителей инфекций и опухолей, лучшие и сильнейшие ассоциации описаны на сегодняшний день составляет от колоректального аденокарциномы и заражения S. Bovis 2 . Более того, этот возбудитель связан с рядом других патологий желудочно-кишечного тракта, такие как аденоматозных полипов толстой, гиперпластический полип и дивертикулит. В соответствии с Золотой и др. 9 , наиболее часто встречающиеся изменения были аденоматозный полип (53%) 9 .

Основываясь на этих данных, можно заключить, что важно для выполнения колоноскопии у всех пациентов с диагнозом заражения S. Bovis , даже в бессимптомной них 2,9 . Более строгие последующие действия, необходимые для этих пациентов, как инфекционный эндокардит может предшествовать началу толстой неоплазии.

Потенциальный конфликт интересов

Нет потенциальный конфликт интересов, имеющих отношение к этой статье сообщалось.

Источники финансирования

Существовали никаких внешних источников финансирования для данного исследования.

Исследование Ассоциации

Это исследование не связано с какой-либо послевузовской программы.



Ссылки

1. Waisberg J, Матеус CO, Pimenta Дж. Инфекционный эндокардит с Bovis стрептококком связаны с раком толстой: доклад случай и обзор литературы. Арк Gastroenterol. 2002; 39: 177-80. [ Ссылки ]

2. Ferrari, Botrugno I, Бомбелли Е, Доминиони T, Cavazzi Е, Диониджи П. Колоноскопия является обязательным после Streptococcus Bovis эндокардит: урок еще не научились: клинический случай. Всемирный J Surg Oncol. 2008, 6: 49. [ Ссылки ]

3. Маккой туалет, Мейсон JM третий. Энтерококков эндокардит связанных с раком сигмовидной: доклад случай. J Med доц государства штат Алабама 1951; 21 (6): 162-6. [ Ссылки ]

4. Ellmerich S, M Шоллер, Duranton B, F Госс, Galluser М, Клейн JP и соавт. Содействие кишечного канцерогенеза Streptococcus Bovis. Канцерогенеза. 2000; 21: 753-6. [ Ссылки ]

5. Барбоза ММ. Endocardite infecciosa: Перфильев клинико ет evolução. Арк Бюстгальтеры Cardiol. 2004, 83: 189-90. [ Ссылки ]

6. Нету Л.С., Gangoni C, V Перейра, Лима RC. Церебральная ишемия, вызванная Streptococcus эндокардит аортального Bovis. Арк Neuropsiquiatria. 2005, 63: 673-5. [ Ссылки ]

7. Bisno AL. Стрептококковой инфекции. В: принципы Харрисона по внутренним болезням. Двенадцатой изд. Нью-Йорк: McGraw-Hill, 1991 год. стр. 563-9. [ Ссылки ]

8. Клейн RS, Каталано MT, Эдберг SC, Кейси СО, Steingbigel NH. Streptococcus Bovis сепсис и рак толстой кишки. Энн внутренний Med. 1979; 91: 560-2. [ Ссылки ]

9. Золото JS, S Баяр, Салем RR. Ассоциация Streptococcus Bovis бактериемии с толстой неоплазии и extracolonic злокачественности. Arch Surg. 2004; 139: 760-5. [ Ссылки ]

http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0066-782X2010001300023&script=sci_arttext&tlng=en#back

Введение

Бета-гемолитические инфекции стрептококковый можно разделить на группы Лансфилд Н и К В. Группы A, B, C, D и G наиболее часто участвуют в болезнях человека. Группа А ( Streptococcus pyogenes ), один из самых распространенных причин фарингит, производит различные кожи и мягких тканей, инфекции, включая целлюлит, рожистое воспаление, и некротизирующий фасциит. Группа B ( S. agalactiae ) была связана с историей рака молочной железы 1,2 и сепсиса и менингита у новорожденных и дородовой и послеродовой лихорадки у женщин. Группа D включает nonenterococci (например, С. Bovis ), которые связаны с желудочно-кишечными новообразований и энтерококки (то есть, Enterococcus фекальный, E. faecium ), которые связаны с инфекциями мочевыводящих путей и полимикробная интраабдоминальных инфекций. Реже, бета-гемолитического инфекции стрептококковый вызваны Лансфилд групп С и G.

Группа G стрептококка (GGS) вызывает различные инфекции, включая бурсит, тендовагинит, септический артрит, остеомиелит, плевролегочный инфекциях, послеродовой сепсис, септический аборт, кожи и мягких тканей, инфекции, бактериемия, эндокардит, перитонит, менингит и ophthalmitis. 3 Это Давно признано, как часть нормальной флоры кожи, ротоглотки и кишечника и половых путей. Предрасполагающие условия, ведущие к заражению GGS включает злокачественные опухоли, сахарный диабет, алкоголизм, ревматоидный артрит, и других иммуносупрессивных состояний. В отличие от стрептококка группы А (ГАЗ), GGS не был связан с токсина 4,5 или рецидивирующие инфекции 5-8 до недавнего времени. Мы сообщаем о случае GGS бактериемии и рецидивирующие целлюлита токсин типа свойства.

Описание случая

67-летняя женщина со стадией IB плоскоклеточный рак шейки матки подверглись радикальной гистерэктомии, двустороннее удаление придатков матки, тазового рассечение узловые, и послеоперационные лучевой терапии 10 лет до поступления. Долгую историю хронической лимфедемы нижних левую ногу в результате до операции и излучения тазовых злокачественности. Она представила с двухдневным истории лихорадка, озноб, тошнота и рвота, боли в левом бедре и ноге с отеком. Она одновременно разработали теплый, нежный, эритематозная сыпь на отдельных регионах ее левого бедра и нижнюю левую ногу. Пациент отрицает какую-либо историю последних травмы или увечья. Дальнейшие допросы показали, по крайней мере шесть аналогичных клинических проявлений с участием той же ноги в течение последних семи лет, в том числе четыре документированные эпизоды в нашем институте. Один эпизод до подобной презентации на другой объект представлен с положительными посевами крови на газ. В каждом из предыдущих случаев в нашем институте, наличие острых, глубокий, венозного тромбоза был ликвидирован трансвенозной ультразвук Доплера, и пациент восстановился после эмпирической внутривенных антибиотиков с последующим пероральным пенициллина при выписке. После того как она была выписана из последней госпитализации, шелушение кожи с участием рук и нижней части ног следует разрешение целлюлитом левой голени.

Физическое обследование отличался ЧСС 110 ударов в минуту, повышение температуры (Т> 102 ° F), хроническая лимфедема, и выраженный отек левой голени. Дискретные области побледнение эритемы, тепло и нежность участие коже левой середине живота, передних отделах левой ноге, а левая ягодица регионе (рисунок). Значения Прием лаборатории были ничем не примечательный, за исключением мягкой лейкоцитоз (количество лейкоцитов крови 15200 / мм 3 ). Посев крови полученной при поступлении вырос GGS.



После первоначального внутривенного оксациллин, а позже тикарциллин / клавуланат, 3 миллиона единиц внутривенно пенициллин G каждые четыре часа вводили после посева крови сообщалось положительным. Лихорадка defervesced быстро, и все сферы эритема заметно улучшилась в течение трех дней. Ультразвуковое доплеровское исследование ее левой нижней конечности показали никаких признаков острого венозного тромбоза. Повторите культур крови были отрицательными. Глоточные и вагинальный культур получены после начала антибактериальной терапии показал нормальную флору, но не GGS. Пациент был выписан через неделю внутривенно антибиотики по ходу устного пенициллин V. Она также была следовать режиму ежемесячных внутримышечных инъекций 2,4 млн. единиц бензатин пенициллина в течение одного года, чтобы предотвратить дальнейшие рецидивы целлюлита.

Обсуждение

GGS инфекций, как известно, колонизировать и инфицировать пациентов с историей основных злокачественных новообразований. 9-11 С октября 1986 по февраля 1998 года, только семь случаев бактериемии GGS были зарегистрированы в нашем институте. Бактериемии больше особенности были замечены у пациентов с уже существующими отеков, вызванных различными причинами. 10 обычных портала вступления в кровоток кожи, но и области слизистой колонизации может привести к бактериемии. У нашего пациента, хроническая лимфедема и потенциальных колонизации GGS тракта или кожи половых могло бы привести к рецидиву инфекции, как это имело место у пациентов с хронической колонизацией пищевода GGS. 12 Ежемесячная внутримышечные инъекции бензатин пенициллин или устные пенициллин V по крайней мере год должен предотвратить эти частые рецидивы.

Хотя GGS является известной причиной целлюлита и бактериемии, рецидивы редко сообщается. 5-8 пациента Наша представлены ее седьмой эпизод целлюлита в семилетний период. На этой последней госпитализации, ее кровь культуры был положительным для GGS. К сожалению, во время предыдущего приема в нашем институте, только один набор культур крови был получен после антибактериальной терапии был начат, который не выявил роста. Распределение ее эритема включены отдельные районы на ее левой нижней конечности, а также левой ягодицы и левой брюшной области. Кроме того, предыдущий эпизод последовал шелушение на ладонях и подошвах. Это предполагает, что возможно токсинами механизм может быть вовлечен в клинический синдром.

В отличие от С. золотистого и ГАЗ, 13 GGS не была связана с токсином производства до недавнего времени. В первом случае заболевания, 4 женщина с острым диффузным миозит GGS в связи с инфекционно-токсический шок. Организм не производит Группа стрептококковых пирогенные экзотоксины, однако он привел хотя бы одного нового токсина с аналогичными свойствами биологических. В другом случае, 5 женщина с плоскоклеточный рак языка представлены повторные эпизоды фарингита из-за GGS. Этот штамм также произвел роман токсина с биологическими свойствами общего с теми газа. Этот случай подчеркивает новых аспектов GGS инфекций, которые ранее были неизвестны - ее способность проявлять токсин типа свойства и производить периодические инвазивные инфекции.

Ссылки

1. Джексон LA, Hilsdon R, Фарли М. М., и др.. Факторы риска для группы заболеваний стрептококками у взрослых. Энн внутренний Med . 1995; 123:415-420

2. Харрисон ЛГ, Али, Дуайер Д. М., и др.. Рецидивирующий инвазивных группы В стрептококковой инфекции у взрослых. Энн внутренний Med . 1995; 123:421-427.

3. Vartian C, Лернер П. И., Shlaes Д.М., и др.. Инфекции, вызываемые Лансфилд группа стрептококков. Медицина. 1995; 64:75-88.

4. Вагнер JG, Schlievert PM, Assimacopoulos А. П. и др.. Острый группы G стрептококковой миозит связанные со стрептококковой синдрома токсического шока. Докладе случай и обзор Clin Infect Dis . 1996; 23:1159-1161.

5. Поблете J, Грин Н., Сандин RL, и соавт. Токсин группы G стрептококка. Докладе случай и обзор Infect Dis Clin практ . 1997; 6:618-619.

6. Nohlgard C, Bjorklind, Хаммар H. Группа G стрептококковых инфекций на дерматологических палату. Acta Derm Venereol . 1992; 72:128-130.

7. Армстронг D, Блевинс, Louria DB и соавт. Группы B, C, G и стрептококковой инфекции в онкологической больницы. Ann NY Изд-во АН . 1970; 174:511-522.

8. Raucher BG, Кларк R, Bottone EJ. Группа G стрептококковой сакроилеит. Diagn Microbiol Infect Dis . 1986; 4:255-257.

9. Гилл М.В., Кунья БА. Группа G стрептококков: обзор. Infect Dis Clin практ . 1995; 4:162-166.

10. Auckenthaler R, PE Херманс, Washington JA II. Группа G стрептококковой бактериемией:. Клинические исследования и обзор литературы Rev Infect Dis . 1983; 5:196-204.

11. Батт А.А., Дженни А. Клиническая характеристика группы G стрептококковой бактериемии. Infect Dis Clin практ . 1998; 7:43-48.

12. Karlawish JH. Группа G стрептококковой бактериемией вызванных бессимптомного рака пищевода у пожилого человека. Южной Med J. 1994; 87:667-668.

13. Мандерс С.М., Хейман WR, Atillasoy Е, и др.. Периодические токсин-опосредованной промежности эритема. Arch Derm . 1996; 132:57-60.
http://www.moffitt.org/ccjroot/v5n2/department5.html
Вернуться к Рак Volume Control Журнал 5 Количество 2

Колоноскопия является обязательным после Streptococcus Bovis эндокардит: урок еще не научились. История болезни
Альберта Феррари * , Иван Botrugno , Elisa Бомбелли , Томмазо Доминиони , Эмма Cavazzi и Паоло Диониджи
* корреспондент автор: Альберта Ferrari albertaferrari@libero.it
Автор Членство
Кафедрой хирургии Университета Павии, Istituto ди Chirurgia Epatopancreatica, Фонд IRCCS Policlinico Сан Маттео, Павия, Италия


Дело презентации
Мы описываем случай 51-летнего человека, который был принят в нашем хирургическом отделении из-за ректального кровотечения и боли в животе. Предоперационная колоноскопии, постановка экзаменов и последующей операции продемонстрировали стенотических аденокарцинома сигмовидной кишки, вторгаясь в левой мочевыводящих путей и гомолатеральной стенки мочевого пузыря, при поражение регионарных лимфатических узлов и массовые bilobar метастазами в печень (T4N1M1). После rectosigmoidectomy Гартмана и, несмотря на системной химиотерапии, быстрое прогрессирование произошло, и пациент прожил всего 5 месяцев после установления диагноза. За пять лет до обнаружения этой передовой толстой рак, пациент подвергся протезирования аортального клапана из-за тяжелой Streptococcus Bovis эндокардита. После этой инфекции он никогда не прошли колоноскопии, пока открыто кишечные симптомы появились.

Заключение
Так как этот случай показывает, в необычной установки Streptococcus Bovis инфекции, необходимо своевременно и тщательно исключать оккультного рака толстой кишки и других злокачественных опухолей во время госпитализации и, если опухоль не найдена, планировать эндоскопического наблюдения. Строгие применения этих рекомендаций в случае, описанном бы вероятно, привело к ранней диагностике рака и, возможно, спас жизнь пациента.

Фон
Хорошо известные отношения были установлены между необычными бактериальных инфекций и опухолевых поражений толстой кишки. Хотя некоторые бактерии были зарегистрированы в связи с толстой рак, сильным и лучше всего документированных отношений сосредотачивается на Streptococcus Bovis[ 1 , 2 ]. Streptococcus Bovis классифицируется как не-энтерококков Streptococcus в группе D Лансфилд и его патогенного возбудителя из нескольких видов инфекции, включая бактериемия, септицемия и эндокардит, но и необычной презентации, такие как эндофтальмита[ 3 ], мягких тканей абсцесс[ 4 ], септический артрит[ 5 ] и другие. Все виды Streptococcus Bovis инфекции были связаны с наличием желудочно-кишечного тракта новообразования, которые в большинстве случаев является толстой аденома или рак.

Несмотря на соглашение в литературе, что эта связь имеет важное клиническое значение, их актуальности до сих пор не получила широкого. Было высказано предположение, что наличие Streptococcus Bovis мандатов инфекции желудочно-кишечного полное обследование и, если отрицательный, эндоскопическая последующей[ 6 ]. Тем не менее, мы сообщаем о случае пациента, который был диагностирован с очень продвинутые рака толстой через пять лет после тяжелой Streptococcus Bovis эндокардита. В обзоре литературы обсуждаются неудачи в случае этого пациента для диагностики рака раньше, подчеркнув необходимость более информированности о Streptococcus Bovis инфекции и риск оккультных толстой опухоль.

Дело Презентация
В январе 2001 года 46-летний пациент был доставлен в больницу с прерывистым низкосортных лихорадка неизвестного происхождения и тяжелой астении, что он испытывал в течение месяца. Его семейная история показала, только в одном случае опухолевых заболеваний среди родителей, братьев и две сестры 5 (его отец умер в 73 лет из-за рака желудка). Пациент был тяжелый курильщик и его личные патологические анамнез не показали соответствующего заболевания, кроме травматических переломов костей. Медицинский осмотр показал, хорошие условия, за исключением наличия лихорадка и слабость. Легкие были ясны, но сердечной аускультации бьет продемонстрировал класс 2 / 6 систолический шум. Лабораторные исследования показали нормальные полный анализ крови (белых клеток крови фото: 8,8 × 10 9 / л с 74% полиморфноядерных лейкоцитов, гемоглобина: 12,6 г / дл), хотя мягкий снижение среднего объема красные клетки из-за низкого железа крови (39 μ г / дл) был найден. Уровень глюкозы, печени и почек были нормальными, в то время как воспалительные тесты результате увеличивается: С-реактивный белок 8,1 мг / дл (0.0-0.8 нормальной мг / дл), альфа-1-глобулин 273 мг / дл (нормальные 33-88 мг / дл), тест erytrosedimentation скорости 43 мм / ч (обычный 0-10 мм / ч). Опухолевые маркеры в том числе РЭА и СА 19-9 Оценивались также и в результате не увеличивается и кала на скрытую кровь была отрицательной. Рентгенологическое исследование грудной клетки была нормальной и ЭКГ регулярный ритм синуса и двухфазные волны T. На 2 -й день госпитализации была выполнена эхокардиография, демонстрируя небольшой растительности аортального клапана связан с умеренным регургитации. Эти результаты привели к диагностике инфекционного эндокардита и пациент был переведен в отделение инфекционных заболеваний нашего госпиталя. Широкий спектр антибактериальной терапии с ампициллином и гентамицином была эмпирически началась и она продолжала так как после нескольких дней, кровь культур продемонстрировали рост Bovis Streptococcus чувствительны к антибактериальной терапии. На 21 -й день госпитализации и через 3 недели после лечения антибиотиками эхокардиографии показал еще два движущихся вегетаций (крупнейший измерения 23 мм Максимальный диаметр с площадью поверхности 0,8 см 2 ) из аортального клапана придерживаясь без коронарной и ишемической право точек возврата, связанных с умеренной регургитацией и мягкой легочной гипертензии. Кроме того, поскольку высокая перемежающаяся лихорадка вновь появилась, антибактериальная терапия эмпирически переключился на ванкомицин. Так как этот случай Streptococcus Bovis эндокардит считался высокий риск эмболии, пациент был переведен в отделение кардиохирургии и на 32 -й день госпитализации ему была сделана замена аортального клапана с механическим протезом. Послеоперационное течение без осложнений; ванкомицина лечения был переведен в тейкопланина на основе антимикробных восприимчивость и, наконец, пациент был выписан. Одного месяца наблюдения после кардиохирургии показали пациента, чтобы быть в хороших клинических условиях.

Никакие дальнейшие осложнения в течение более пяти лет после успешного лечения Streptococcus Bovis эндокардит, и пациент не претерпела клинических осмотров или диагностической оценки.

В ноябре 2006 года, и того же пациента пошел к своему семейному врачу жаловаться на 15% потери веса в течение последних трех месяцев, а также астения и запоры. Кровь экзамены показали hypocromic microcitic анемия (гемоглобин 8,8 г / дл), высокий уровень раково-эмбрионального антигена (РЭА: 2221 нг / мл) и кала на скрытую кровь была положительной. Боль в животе и кровотечение из прямой кишки произошла несколько дней после этих экзаменов и пациент поступил в наш отдел хирургии. Колоноскопия была выполнена выявления стеноза сигмовидной толстой кишки: изучение оставшихся участков толстой кишки не представляется возможным из-за тяжелой обструкции. При гистологическом исследовании биопсий показали сигмовидной аденокарциномы толстой кишки. В дополнение к механической обструкции кишечника, как УЗИ брюшной полости и КТ показало наличие нескольких очаговых поражений печени с широким распространением bilobar (рис.1 ). Лапаротомных операция была затем выполняется: интраоперационные исследования подтвердили передовых сигмовидной опухоли толстой кишки с тазовой диффузии, прямое вторжение в левой стенки мочевого пузыря и мочевыводящих путей левой и множественные метастазы в печени bilobar. Резекция паллиативной Гартмана верхней прямой кишки и сигма с левой колостомы и биопсия поражений печени были выполнены. Послеоперационное течение без осложнений.

Рисунок 1. Брюшной КТ проводится до операции показывает, как механическая обструкция кишечника и печени диффузные очаговые поражения за счет опережающего метастатической болезнью.
Окончательного гистологического исследования резекцию сигмовидной кишки подтвердили наличие умеренно дифференцированные (G2), аденокарциномы толстой кишки проникают всю толщину стены и окружающий внутренности тканях, с вторичным конкреций на серозной поверхности; она инфильтративный характер роста с лимфатической вторжения, так и бедных перитуморальной лимфоцитарной реакции. Один из 23 региональных лимфатических узлов, привлеченных опухоли и биопсия печени подтвердили клинические данные широко распространенных метастазов печени диффузии. Окончательный этап патологического изменения герцогов D (T4N1M1).

Несмотря на агрессивный режим polichemotherapy началось в декабре 2006 года, показал, опухоль значительно быстрым прогрессированием. В апреле 2007 года, пациент перенес операцию еще раз, из-за кишечная непроходимость; предоперационной КТ продемонстрировал массовый тазовых рецидивов и правого легкого неопластических лимфангит. Лапаротомных хирургии подтвердил малом тазу с диффузной перитонеального карциноматоз, поэтому паллиативная кишечного анастомоза в обход основного сайта окклюзии была выполнена. Послеоперационный курс характеризуется стойкими шока и полиорганной недостаточности не реагируют на интенсивную поддержку терапии и двенадцать часов после операции пациент умер. Пациент жизни после диагноза рака толстой было 5 месяцев.

Обсуждение
Возникновении бактериальный эндокардит вместе с толстой рак впервые стало известно в 1951 году [ 7 ], однако это было только в 1977 году, что Streptococcus Bovis был признан Кляйн и др.. как патогенного возбудителя, непосредственно связанные с наличием толстого рака[ 1 ]. Хотя многие авторы сообщали связь между этим видом опухоли и многие штаммы бактерий, самые сильные и лучшие документально ассоциации остается один между толстой рака и Streptococcus Bovis инфекции.

Многие другие клинические случаи и два перспективных исследований в литературе подтвердили гипотезу, что развитие Streptococcus Bovis инфекция может представлять первый признак рака толстой. Первая серия сообщалось в 1979 году Клейн и соавт.[ 8 ]: от полного желудочно-кишечного оценка 15 пациентов с Bovis Streptococcus септицемия, 13 случаев (86,6%) опухоли были найдены. В частности, у 11 пациентов была толстой заболеваний, включая 2 аденокарциномы, 6 микрокарцином (обнаружен в 5 ворсинок аденомы и 1 аденоматозный полип) и 3 доброкачественные полипы аденоматозный, 2 других пациентов, пострадавших от пищевода рак. Из этого исследования важный урок был усвоен в первый раз: в большинстве случаев Streptococcus Bovis инфекции сопутствующих колоректальным раком можно ожидать, и это свидетельство мандатов эндоскопическое исследование. Более того, наличие верхних отделов желудочно-злокачественности тракта также должны быть рассмотрены. Второе проспективное исследование в литературе сообщил Уилсон и соавт. в 1981 году[ 9 ] подтвердили высокий (62%) распространенность заболеваний толстой в 21 пациентов, страдающих Streptococcus Bovis эндокардит, даже если в этой серии у большинства пациентов была доброкачественной патологии (воспалительные заболевания кишечника, дивертикулы, полипы или ворсинок аденома) и только 5% пострадавшим от толстого рака.

Патогенез связь между Streptococcus Bovis инфекции и заболевания толстой был исследован ряд исследований, однако он по-прежнему не ясно. Sreptococcus Bovis является нормальным обитателем желудочно-кишечном тракте человека, о чем свидетельствует тот факт, что она может быть найдена в фекальных образцов около 5-16% от здорового населения. Увеличение доли до 56% была отмечена в случае воспалительных заболеваний кишечника и рака толстой[ 1 ], но эти данные не были подтверждены в более поздних исследованиях[ 10 ]. Гипотезу, что изъязвление опухолевых поражений будет непосредственно открыть путь для бактерий, чтобы войти в кровоток не объясняет случае связь между Streptococcus Bovis и не изъязвленные толстой полипы или аденомы. Представляется более вероятным, что бактериальная транслокация без необходимости слизистой разрушение может произойти из-за сосудистых изменений, связанных с несколькими желудочно-кишечных заболеваний[ 11 ]. Дальнейшие связи между Streptococcus Bovis бактериемии и заболевания печени, как сообщается, таким образом, предполагая, что нарушение функции печени (выделение солей желчных кислот, производство immunoglobuline) могут играть определенную роль в изменении толстой флоры и / или бактериальной транслокации[ 12 , 13 ]. Недавние исследования показали интригующая гипотеза, что большинство пациентов, страдающих раком толстой развиваться латентная инфекция, хотя он только становится очевидным, когда нарушения иммунной системы или сердечными поражениями клапанов происходит. Идентификация опухолеассоциированных Streptococcus Bovis молчать infectionthrough профилирования гуморальный иммунный ответ представляет собой многообещающий потенциал средств для профилактики и ранней диагностики рака толстой[ 14 ]. Наконец, непосредственную роль carcinogenetic из Streptococcus Bovis возможно из-за его продемонстрирована способность в крысиной модели для содействия предварительно опухолевой прогрессии поражения толстой [ 11 ].

Хотя знания об истинном патофизиологических отношений между Streptococcus Bovis инфекции и желудочно-кишечного неоплазии требует дальнейшего исследования, то это уже хорошо признал, что тесная связь существует, и имеет важное клиническое значение. С начала отчеты[ 1 , 2 , 15 ] до сих пор было показано, что эндоскопическое обследование может обнаружить оккультные доброкачественные, предварительно злокачественных и раковых заболеваний толстой кишки у большинства пациентов с Streptococcus Bovis инфекции[ 12 , 16 ]. Как недавно сообщили золото и соавт. этот вывод составляет от 6% до 71% в литературе для[ 17 ]. Кроме того, те же авторы также подчеркивают ранее недооцененных связь между Streptococcus Bovis инфекции и extracolonic и даже внекишечных злокачественных новообразований.

На основе этих данных, в последние десятилетия, некоторые авторы выступают за необходимость соответствующего эндоскопического обследования на полипов и злокачественных опухолей даже в asympthomatic пациентов, когда Streptococcus Bovis инфекции признается[ 1 - 6 , 15 - 18 ]. Примечательно, что Streptococcus Bovis группа бактерий недавно был переклассифицирован на основе ДНК-ДНК hybridisations и филогенетического анализа последовательностей 16S РНК гена[ 19 ]; на этой основе биотипов я и II.2 были переименованы Streptococcus gallolyticus (subsp. gallolyticus и подвид. pasteurianus , соответственно). Поскольку эти изменения в номенклатуре может представлять ловушка в признании основной опухоли толстой кишки оккультных [ 20 ], мы рекомендуем врачам быть предупреждены, что диагноз gallolyticus Streptococcus инфекцией же клинических проявлений Streptococcus Bovis[ 21 ]. Кроме того, Streptococcus gallolyticus подвид. gallolyticus является новым названием Streptococcus Bovis биотип I, который был чаще ассоциируется с раком оккультных[ 22 ], так что необходимость эндоскопического скрининга является даже более сильным в этом случае.

Хотя это уже хорошо признал, что клинические установки Streptococcus Bovis (или gallolyticus ) инфекции мандатов диагностической работы-до раскрыть оккультных неоплазии, кажется, что осведомленность врачей, которые заботятся о таких пациентов остается низким, а не только из-за ловушки номенклатуры. Золото и соавт. предупредили о недоиспользования колоноскопии в популяции пациентов с Streptococcus Bovis бактериемии[ 17 ] и Wentling и соавт. недавно предположил, что диагностическая оценка должна быть запланирована перед выпиской из больницы[ 6 ].

Наш опыт проливает свет на важность проведения полной диагностической оценки, чтобы исключить двоеточие оккультного или даже extracolon рака во время стационарного лечения, избегая сосредоточиться только на лечении инфекционных заболеваний.

Примечательно, что данные, собранные из опубликованной серии показывают, что выполнение скрининга колоноскопии после Streptococcus Bovis инфекции позволяет обнаружения неоплазии толстой в начале или предраковые этапов в большинстве случаев[ 8 , 16 , 17 ]. Этот вывод был недавно поддерживаются исследования по профилям бактерии антиген, показывая, что заражение происходит на ранних стадиях канцерогенеза[ 14 ]. Кроме того, было высказано предположение, что отрицательные диагностической оценки во время инфекция не достаточно, потому что полип толстой или рак может развиться через несколько лет после Streptococcus Bovis инфекции[ 18 , 23 ]. В ожидании новых технологий для скрининга рака толстой, колоноскопия-прежнему остается наиболее эффективным инструментом для наблюдения таких пациентов с риском развития рака толстой кишки. Частота эндоскопического исследования у таких больных не было установлено, все же, однако, на наш взгляд, продемонстрировали высокий риск развития новообразований толстой кишки, которая оправдывала бы ежегодный скрининг колоноскопии.

Присутствие в нашей больной сигмовидной аденома или рак во время Streptococcus Bovis эндокардит является неопределенным, поскольку поражения не были исследованы. Однако, даже если общее воздействие эндоскопическое обследование и последующие меры на выживание у пациентов, которые были затронуты Streptococcus Bovis инфекции неизвестен, в данном случае мы сообщали, являются законными предположить, что ежегодное наблюдение привело бы к ранней диагностике и потенциально радикального лечения, тем самым спасти жизнь пациента.

Заключение
В необычной установки Streptococcus Bovis инфекции, этот случай подчеркивает необходимость своевременной и тщательно исключать скрытого рака толстой кишки и других злокачественных опухолей во время госпитализации и, если опухоль не найдена, планировать ежегодные эндоскопические наблюдения.

Конфликт интересов
Авторы заявляют, что они не имеют конкурирующие интересы.

Авторы взносов
А. Ф.: принцип следователь, который подготовил, организовал, писал и редактировал все аспекты рукописи. И.Б.: хирургический онколог, участвующих в определении отношений между раком толстой кишки и предыдущие Streptococcus Bovis инфекции. Э.Б.: участие в клинических управления и оценки литературы. TD: поддерживается работа принцип следователь при подготовке рукописи. ЕС: поддерживается работа следователя в принципе написание и редактирование рукописи. PD: он читал, редактировал, и утвержден окончательный вариант рукописи. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Благодарности
Письменное согласие было получено от пациента к публикации исследования в апреле 2007 года, перед вторым абдоминальной хирургии. Копия письменного согласия доступна для рассмотрения главного редактора этого журнала.

Ссылки
Клейн RS, Recco РА, Каталано MT, Эдберг SC, Кейси СО, Steigbigel Ник Хайдфельд: Ассоциация Streptococcus Bovis и рак толстой кишки.
N Engl J Med 1977, 297 : 800-802. PubMed Аннотация
Steinberg D, Наггар CZ: Streptococcus Bovis эндокардит с раком толстой кишки.
N Engl J Med 1977, 297 : 1354-1355. PubMed Аннотация
Bleibel Вт, D'Сильва К Elhorr, Bleibel S, Dhanjal U: Streptococcus Bovis эндофтальмита: уникальная презентация рака толстой кишки.
Dig Dis Научно 2007, 52 (9) : . 2336-2339 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Goumas PD, Naxakis СС, Rentzis Г.А., и др. :. Боковое абсцесс шеи вызванных Streptococcus Bovis у пациентов с невыявленным рака толстой кишки.
J Laryngol Otol 1997, 111 : . 666-668 PubMed Аннотация
Гарсия-Porrua C, Гонсалес-Gay М.А., Монтерросо JR, Санчес-Adrade, Гонсалес-Рамирес: Септический артрит из-за Streptococcus Bovis как представление знак молчать карциномы толстой кишки.
Ревматологии 2000, 39 : . 338-339 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Wentling Г.К., Мецгер PP, Дозуа Е.Ю., Чуа HK, Кришна М: Необычные бактериальных инфекций и колоректального рака - Streptococcus Bovis и Clostridium Septicum : доклад трех случаях.
Дис Colon прямой кишки 2006, 49 : 1223-1227. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Мак-Кой туалет, Массон JM: энтерококков эндокардит связанных с раком сигмовидной: доклад случай.
J Med доц Stat Alab 1951, 21 : 162-166.
Клейн RS, Каталано MT, Эдберг SC, Кейси СО, Steigbigel Ник Хайдфельд: Streptococcus Bovis сепсис и рак толстой кишки.
Энн внутренний Med 1979, 91 : 560-562. PubMed Аннотация
Уилсон WR, Томпсон RL, Wilkowske CJ, и др. :. Краткосрочная терапия стрептококкового инфекционный эндокардит.
JAMA 1981, 245 : . 360-363 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Поттер М.А., Канлайфф Н. А., Смит M, Майлз RS, Flapan н.э., Dunlop М.: перспективные контролируемом исследовании ассоциации Streptococcus Bovis с толстой карциномы.
J Clin Pathol 1998, 51 : . 473-474 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Ellmerich S, M Шоллер, Duranton В, и др. :. Содействие кишечного канцерогенеза Streptococcus Bovis .
Канцерогенеза 2000, 21 : 753-756. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Жаркин Б.А., Lillemoe К.Д., Камерон JL, Эфрона П.Н., Магнусон TH, Питт HA: триада Streptococcus Bovis бактериемии, толстой патологии и заболевания печени.
Энн Surg 1990, 211 : . 786-791 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Триподи М.Ф., Adinolfi LE, Raone Е, Durnte Mangoni E, R Фортунато, Iarussi D, Руджеро G, Utili R: Streptococcus Bovis эндокардита и его связи с хроническим заболеванием печени: understimate фактором риска.
Clin Infect Dis 2004, 38 : 1394-1400. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Tjalsma H, Шоллер-Guinard М, Lasonder Е, Ruers TJ, Виллемс HL, Swinkels DW: Профилирование гуморального иммунного ответа у больных раком толстой кишки: диагностика антигенов из Streptococcus Bovis .
Int J Рак 2006 года, 119 (9) : . 2127-2135 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Розы DF, Richman H, Localio SA: бактериальный эндокардит связано с колоректальным раком.
Энн Surg 1974 г., 179 : . 190-1 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Балет М, Gevigney G, Gare JP, Delahaye F, J Этьен, Delahaye JP: Инфекционный эндокардит из-за Streptococcus Bovis : доклад 53 случаев.
Eur J Сердце 1995, 16 : 1975-1980. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Золото JS, Баяр S, Salema ОР: Ассоциация Streptococcus Bovis бактериемии с толстой неоплазии и extracolonic злокачественности.
Arch Surg 2004, 139 : . 760-765 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Балет М, Gevigney G, Gare JP, Delahaye F, J Этьен, Delahaye JP: Инфекционный эндокардит из-за Streptococcus Bovis . Доклад на 53 случаев.
Eur J Сердце 1995, 16 : 1975-1980. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Шлегель L, Гримонт F, Ageron Е, Гримонт PAD, Буве: Переоценка таксономии Streptococcus Bovis / Streptococcus эквинусная комплекса и связанных с ними видов: описание подвид gallolyticus Streptococcus. gallolyticus подвид. Ноябрь, Streptococcus gallolyticus подвид. Македония подвид. ноя . и Streptococcus gallolyticus подвид. pasteurianus подвид. ноя .
Int J Syst Evol Microbiol 2003, 54 : 631-645. Издатель Полный текст
Вант Wout JW, Bijlmer HA: Бактериемия из-за Streptococcus gallolyticus или опасности пересмотренных номенклатуры в бактериологии.
Clin Infect Dis 2005, 40 : 1070-1071. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Кок H, R Jureen, Скоро CY, Тей BH: Рак толстой кишки представляет, как Streptococcus gallolyticus инфекционный эндокардит.
Сингапур Med J 2007, 48 : E43-45. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Руофф KL, Мельник С.И., Гарнер CV, Ферраро MJ, Калдервуд SB: Бактериемия с Streptococcus Bovis и Streptococcus salivarius : клинические корреляты более точной идентификации изолятов.
J Clin Microbiol 1989 года, 27 : . 305-308 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Роббинс N, Клейн RS: Рак толстой кишки через 2 года после эндокардит из-за Streptococcus Bovis .
Am J Gastroenterol 1983 году, 78 (3) : . 162-163 PubMed Аннотация
http://www.wjso.com/content/6/1/49

Инфекционный эндокардит в связи с Streptococcus Bovis. Доклад на 53 случаев.
Балет M , G Gevigney , Gare JP , Delahaye F , J Этьен , Delahaye JP .
Источник
Hôpital Cardiologique, Лион Montchat, Франция.
Абстрактный
Пятьдесят три пациента (42 мужчин, 11 женщин) с Streptococcus инфекционный эндокардит Bovis участие третичной больницу кардиологии в период между 1980 и 1991, и составила 11% от общего числа случаев инфекционного эндокардита госпитализированы там в этот период. Средний возраст составил 59 + / - 15 лет; 15 ранее страдали заболевания клапанов (12) или же клапанного протеза (3), один пациент имел предыдущий инфекционный эндокардит. Инфекционный эпизод участие аортального клапана у 26 пациентов, оба аорты и митрального клапана у 18 больных, митрального клапана только в шести и других клапанов в три. Эхокардиографические экспертиза показала, одного или нескольких вегетаций у 44 пациентов. Сердечная недостаточность была диагностирована у 35 больных и эмболических эпизодов в 22 человек, из которых 11 были нарушения мозгового кровообращения. Больные стали афебрильной 19 + / - 39 дней после начала лечения антибиотиками. Клапан замена была выполнена у 37 больных в процессе их первичной госпитализации, и в четырех во время наблюдения. После среднего периода наблюдения 4,6 + / - 3,1 лет с 100%-наблюдения, 15 больных умерли: 1 до операции, по одной в первые 30 дней после операции, 13 спустя (8141 оперированных больных и 5 / 12 не работает пациентов). Актуарная выживаемость составила 73% в течение 5 лет. Желудочно-кишечные признаки присутствовали у 12 пациентов, 43 пациентов (81%) имели полное толстой обследование, которое показало, полипов у 20 пациентов и аденокарциномы в семи. Из 11 смертей поздно четыре были связаны с толстой злокачественной опухоли. Это исследование подтверждает, что Streptococcus Bovis инфекционного эндокардита является "относительно мягкими», но он подчеркивает, частоты и тяжести потенциального связанные толстой повреждения, требующие колоноскопии и делая лечение повышенного риска поражения обязательным.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez/8682035?dopt=Abstract&holding=f1000,f1000m,isrctn

Разработан гибридный пептид TPR ориентации Hsp90 в качестве нового противоракового средства
Tomohisa Horibe , Масаюки Коно , Мари Haramoto , Кодзи Охара и Кодзи Каваками
Департамент фармакоэпидемиологии, Высшая школа медицины и общественного здравоохранения, Университет Киото, Йошида Konoecho, Sakyo-ку, Киото, 606-8501, Япония
автор электронной почте соответствующее электронной почты автора

Журнал Поступательное медицины 2011 года, 9 : 8 DOI: 10.1186/1479-5876-9-8

Электронная версия данной статьи является полное одну и можно найти в Интернете по адресу: http://www.translational-medicine.com/content/9/1/8

Поступило в редакцию: 14 октября 2010
Принято редколлегией: 14 января 2011
Опубликовано: 14 января 2011
© 2011 Horibe и др.; лицензиат BioMed Central ООО
Это Открытого статье доступа распределенной в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution ( http://creativecommons.org/licenses/by/2.0 ), что позволяет неограниченное использование, распространение, и воспроизводства на любом носителе, при условии, оригинальная работа правильно цитируется.

Абстрактный

Фон
Несмотря на постоянно совершенствующихся понимание молекулярной биологии рака, лечение большинства раковых заболеваний не изменилась в течение последних трех десятилетий, и препараты, которые не делают различий между опухолевыми клетками и нормальные ткани остаются опорой противоопухолевой терапии. Так как Hsp90, как правило, участвуют в пролиферации и выживания, это как полагают, играет ключевую роль в рак, и Hsp90 вызвало значительный интерес в последние годы в качестве потенциальной терапевтической мишени.

Методы
Мы сосредоточили свое внимание на взаимодействии Hsp90 с белком p60/Hop кофактора, и спроектирован клеточной проницаемой пептидомиметик, называемые "гибридные Antp-TPR пептид", по образцу обязательным интерфейс между молекулярными шаперона Hsp90 и домен TPR2A хмеля.

Результаты
Было показано, что эта разработана гибридная Antp-TPR пептид ингибирует взаимодействие Hsp90 с доменом TPR2A, вызывая гибель клеток рака молочной железы, поджелудочной железы, почек, легких, простаты и рака желудка клеточных линий в пробирке . В противоположность этому, Antp-TPR пептида не влияют на жизнеспособность нормальных клеток. Более того, анализ в естественных условиях показало, что Antp-TPR пептид отображается значительные противоопухолевую активность в ксенотрансплантата модели человеческого рака поджелудочной железы у мышей.

Заключение
Эти результаты показывают, что Antp-TPR пептида даст мощный и селективный противоопухолевой терапии онкологических больных.

Фон

Тепло-шока 90 (Hsp90) является молекулярный шаперон [ 1 ], что участвует в контроле качества сворачивания белка. Механизм действия Hsp90 включает последовательные циклы АТФазы и ступенчатый набор cochaperones, в том числе Hsp70, CDC37, p60/Hsp-organizing белка (Hop) и p23[ 2 , 3 ]. В частности, Hsp90 и Hsp70 взаимодействует с многочисленными кофакторов содержащие так называемые tetratricopeptide повторить (TPR) областях. TPR доменов состоит из свободно сохраняется 34-аминокислотной последовательности мотивов, которые повторяются от одного до 16 раз для каждого домена. Первоначально, определенных в компонентах анафазе способствующих комплекс[ 4 , 5 ], TPR областях, как известно, посредником специфические взаимодействия белков в различных контекстах сотовых[ 6 - 8 ]. Более того, кроме от отбывания просто якорь функций, TPR области хип шаперона кофакторов и p60/Hop также способен регулировать АТФазы деятельности Hsp70 и Hsp90, соответственно[ 9 , 10 ]. Каждый 34-аминокислота мотив образует пару антипараллельных α -спиралей. Эти мотивы расположены в тандеме массива в сверхспирализации структуру, которая охватывает центральные канавки. TPR-домен-содержащих кофакторами Hsp70/Hsp90 мульти-шаперонов системы взаимодействуют с С-концевых участков Hsp70 и Hsp90[ 11 ]. Исследования с участием удаления мутагенеза предположили, что С-концевой последовательности мотив EEVD-COOH, который высоко сохраняется во всех Hsp70s и Hsp90s из эукариотических цитозоле, играет важную роль в TPR-опосредованной кофактора обязательных[ 12 ]. Хоп служит адаптер белка Hsp70 и Hsp90[ 13 , 14 ], оптимизации их функционального сотрудничества[ 15 ], не сама выступает в качестве молекулярного шаперона[ 16 ], и содержит три TPR доменов, каждый из которых содержит три мотивы TPR[ 17 ]. N-терминал TPR области хоп, TPR1, в частности, признается, С-концевой семь аминокислот Hsp70 (PTIEEVD), тогда как TPR2A признает С-концевой пять остатков Hsp90 (MEEVD)[ 17 ].

Hsp90 имеет ограниченный репертуар клиента белков, например, несколько киназ, среди других белков, которые связываются с Hsp90 для правильного созревания, и Hsp90, как правило, участвуют в пролиферации и выживания [ 2 , 3 ]. Это как полагают, играет ключевую роль в рак[ 18 - 20 ], в которых стресс-реакция признания Hsp90 может способствовать опухолевых клеток адаптации в неблагоприятных средах[ 21 ]. Понимание этого пути создала жизнеспособный терапевтические возможности[ 22 ], и молекулярные адресности Hsp90 АТФазы классом антибиотиков ansamycin прототипически примере гелданамицина[ 23 ] показал, перспективных противоопухолевой активности, отключив несколько сигнальных сетей, необходимых для опухолевых клеток обслуживание[ 24 ]. Хотя многие Hsp90 ориентированных соединений в настоящее время изучаются для противоопухолевого терапевтический потенциал, молекулярный механизм их противоопухолевой активности, пока неясно. В последнее время Gyurkocza и др. . сообщил Роман антагонист пептидил взаимодействия между Hsp90 и сурвивина, и назначил его "shepherdin"[ 25 , 26 ]. Сурвивина является членом ингибитор апоптоза семья ген[ 27 ], и участвует в контроле митоза и подавление апоптоза или гибель клеток[ 28 ]. Показано, что shepherdin делает широкие контакты с карманного АТФ Hsp90, дестабилизирует его белков клиента, и вызывает массовую гибель раковых клеток от апоптоза и nonapoptotic механизмов. Поразительно, shepherdin не снижает жизнеспособность нормальных клеток[ 25 , 26 ]. Эти результаты показывают, что не только небольшие соединения, но и пептиды ориентации Hsp90 даст мощный избирательности противоопухолевого в рак подшипников хоста.

В этом исследовании мы разработали новый гибридный пептид, состоящий из клеточной мембраны, проникать и Hsp90 ориентированных последовательностей. Структура основе мимики нарушить взаимодействие между Hsp90 и домен TPR2A хмеля было продемонстрировано, как и эффективностями в пробирке и в естественных условиях этого пептида препарата против рака.

Методы

Материалы
Анти-Hsp90 и анти-Hsp70 антител, человеческий рекомбинантный Hsp90 α , и хоп (p60), были приобретены у Bioreagents Stressgen. Анти-Akt и анти-CDK4 антитела были приобретены у клеточной сигнализации. Анти-сурвивина антител был приобретен у компании Thermo Scientific. Человеческий рекомбинантный FKBP5 и PP5 были приобретены у Abnova. Anti- β -актин антител и человеческого рекомбинантного Hsp70 были приобретены у SIGMA. Все реагенты были реагента класса качества.

Процедить и плазмиды
Кишечной палочки AD494 (DE3) { Δ ара , лей 7697, Δ лак X74, Δ фотонов , Pvu II, Пхо R, Δ мал F3, F '[ лак - , ( LacI д ), про ], TRX B:: кан (DE3)} и ПЭТ-15b (Novagen Inc) были использованы для выражения домена TPR2A из человека-хопа.

Клеточные культуры
Следующие человеческой опухоли и нормальные клеточные линии были получены из Американской коллекции типовых культур (АТСС): рака молочной железы человека (BT-20, T47D, и MDA-MB-231), рак легких (A549), рак почки (Caki-1 ), рак предстательной железы (LNCaP), рак желудка (OE19) и легких фибробластов (MRC5). Человеческого рака поджелудочной железы клеточной линии (BXPC3) был приобретен у европейской коллекции клеточных культур (ЕСАСС). Человека эмбриональные линии клеток почек (HEK293T) и человеческого нормальной поджелудочной железы эпителия (ПЭ) клеточной линии ACBRI 515 были приобретены у RIKEN банк клеток и DS Pharma биомедицинских соответственно. Клетки культивируют в RPMI-1640 (BT-20, MDA-MB-231, T47D, LNCaP, OE19 и BXPC3), MEM (MRC5 и A549), DMEM (HEK293T и Caki-1) или CSC (PE), содержащий 10 % эмбриональной телячьей сыворотки (FBS), 100 μ г / мл пенициллина и 100 μ г / мл стрептомицина.

Синтеза пептидов
Пептиды, используемые в настоящем исследовании были синтезированы Invitrogen или SIGMA. Все пептиды были синтезированы с использованием твердофазной химии, очищают до однородности (т.е.> 90% чистоты) на обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии и оценивается масс-спектрометрии. Пептиды растворяли в воде и буфером до рН 7,4. Последовательность TPR 301K-312K (KAYARIGNSYFK; TPR), TPR мутант 1 (KAYA А. А. GNSYFK; мутировал аминокислоты подчеркнуть), TPR мутант 2 (KAYARIGNS GGG ), и схватка пептид (RKFSAAIGYNKY) были сделаны ячейки проницаемой добавлением спирали III ячейки проникающим последовательность Antennapedia homeodomain (подчеркнуто ниже)[ 29 ], а именно: RQIKIWFQNRRMKWKK KAYARIGNSYFK (Antp-TPR), RQIKIWFQNRRMKWKK KAYAAAGNSYFK (Antp-TPR мутант 1), RQIKIWFQNRRMKWKK KAYARIGNSGGG (Antp-мутант TPR 2), а RQIKIWFQNRRMKWKK RKFSAAIGYNKY (Antp-борьба).

Выражение и очистки домена TPR2A от человека хоп
Домена TPR2A (223K-352L) человеческого хоп был клонирован в рамке в Xho я и Bam HI сайтов ПЭТ-15b для экспрессии в E. кишечной AD494 (DE3) и очищали с использованием никель-хелатирующие смолы колонке, как описано выше[ 30 ]. Для подтверждения наличия очищенный белок, SDS / PAGE была выполнена в соответствии с методом Laemmli[ 31 ].

Поверхностных плазмонов резонанса (SPR)
SPR Эксперименты проводились с 3000 Biacore биосенсор системы, как описано выше [ 30 , 32 ]. Человеческий рекомбинантный хоп, FKBP5, PP5, и очистил TPR2A области хоп белки иммобилизованных на поверхности чипов CM5 датчик через N -гидроксисукцинимида и N -этил- N '- (диметиламинопропил) карбодиимида активации химии в соответствии с инструкциями производителя. Биотин-сопряженных TPR пептид (биотин-TPR) была иммобилизованных на поверхности стрептавидином (SA), датчик чипа. Как аналита, несколько концентрации Hsp90 и Hsp70 вводили над потоком-клеток при скорости потока 30 μ л / мин при 25 ° C. HBS-EP буфера (0,01 М М Hepes/0.15 NaCl/0.005% Твин 20 / 3 мМ ЭДТА, рН 7,4) был использован в качестве буфера работает во время теста для подавления неспецифического связывания. Анализ данных проводили с помощью оценки BIA версии 4.1 программного обеспечения. Конкурс были проведены эксперименты по preincubating Hsp90 и Hsp70 с короткими, определены пептиды или пептидные комбинаторной смесей в соответствии с методом Бринкер и др. .[ 30 ]. Вкратце, белок / пептид смесей были переданы иммобилизованных хоп, FKBP5, PP5 или TPR2A области хоп, и переплетов или Hsp90 Hsp70, чтобы эти белки были соблюдены. SPR сигналов, полученных в отсутствие конкурирующих пептиды были использованы в качестве ссылки (100% обязательную силу), чтобы нормализовать значения, полученные в присутствии пептидов. На конкурс экспериментов определены пептидов концентрация белка TPR оставалось постоянным, тогда как пептид концентрации белка / пептидных смесей была увеличена систематически.

Вестерн-блоттинга
Вестерн-блот анализ проводили, как описано выше [ 33 ]. Короче говоря, белковые экстракты получают из клетки лизировали буфером, содержащим 1% (об. / об), Тритон Х-100, 0,1% (м / о) SDS, и 0,5% (м / о) дезоксихолата натрия, разделенных SDS / PAGE, и переданы на нитроцеллюлозные фильтры. Закаленные мембран были исследованы с антителами и проанализированы с помощью усовершенствованных реагентов хемилюминесценции (GE Healthcare) с LAS-3000 LuminoImage анализатор (Fujifilm).

Анализ на жизнеспособность клеток
Клетки высевали на 96-луночных планшетах в 2000-3000 клеток / лунку и инкубировали с тестом пептида. После инкубации тест для жизнеспособности клеток проводилась с использованием живой клетки графа реагентов SF (Nacalai Tesque) в соответствии с протоколом производителя. Поглощение измеряли при длине волны 450 нм, используя 96-ю лунками читателя (GE Healthcare).

Флуоресцентная микроскопия
BXPC3 клетки помещали в стеклянный дном блюдо на 1 × 10 6 клеток на мл средних и малых аликвоты меченых пептидов, Antp-TPR-TAMRA-OH или TPR-TAMRA-OH (Invitrogen) (15 μ л) были добавлены непосредственно в блюдо в конечной концентрации 10 μ М. Через 2 ч инкубации внутриклеточное проникновение пептидов визуализируется Olympus FV1000 конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (Olympus).

Анализа проточной цитометрии
После инкубации с или без Antp-TPR пептид, клетки собирали и дважды промывают PBS. После этого клетка гранулы ресуспендировали. Проточная цитометрия (Becton Dickinson) анализ проводили с использованием Аннексин V-Fluorescein Окрашивание Kit (Вако) или карбоксифлуоресцеина FLICA каспазы 3 и 7 анализа комплект (иммунохимии технологий) в соответствии с протоколом производителя. Данные были проанализированы с помощью CellQuest программного обеспечения.

Противоопухолевую активность Antp-TPR пептида в опухоли ксенотрансплантаты в естественных условиях
Эксперименты на животных были проведены в соответствии с руководящими принципами Киотской школы медицины университета. Клетки поджелудочной железы клеточная линия BXPC3 (5 × 10 6 клеток), ресуспендировали в 150 μ л PBS, были пересажены подкожно в область фланге 7-9-недельных athymic голым мышам весом 17-21 г. При опухолях составил около 50 мм 3 в объеме, животные были рандомизированы на три группы, и PBS (контроль) или Antp-TPR пептид (1 или 5 мг / кг) вводили внутривенно (50 μ л / инъекции) три раза в неделю в течение в общей сложности девять доз. Опухоли были измерены с суппортом, и объем опухоли (в мм 3 ) была рассчитана по следующей формуле: длина х ширина 2 × 0,5. Все значения выражены как среднее ± SD и статистического анализа была рассчитана путем одностороннего дисперсионного анализа с тест Даннетт. Различия считались значение при Р <0,05.

Иммуногистохимия
Иммуногистохимическое окрашивание проводили, как описано выше [ 34 ]. Короче говоря, BXPC3 опухоли из животных, получавших либо физиологическим раствором или Antp-TPR пептид (5 мг / кг) внутривенно были собраны в конце лечения, а затем заливали в парафин после фиксации с 10% формальдегида в PBS. После deparaffinized и увлажненной, опухоли разделы лечились с антителами, а затем активность пероксидазы был обнаружен путем инкубации в 0,05% 3, 3'-диаминобензидина тетрахлорметана в PBS (pH7.2), содержащий 0,012% H 2 O 2 .

Результаты

Дизайн TPR пептид
Хорошо известно, что функциональная форма Hsp90 является комплекс, в котором шаперонов Hsp90 и Hsp70 собираются вместе, связывая хоп [ 14 ] и сборке этого multiprotein комплекса достигается при помощи двух независимых доменов TPR1 и TPR2A на-хопа. В комплексе TPR2A и С-концевой области Hsp90, Lys Arg 301 и 305 в спирали А3 облигаций TPR2A пожертвовать водорода соответствующих боковыми Asp и Glu в Hsp90 С-концевой области[ 17 ]. Кроме того, Arg 305 в спирали А3 хорошо сохранились среди других областей TPR[ 17 ], и мутации этого остатка Arg в Ала в TPR области Tom70 имеет решающее значение для связывания с Hsp90[ 35 ]. Опираясь на эти данные, мы разработали новый TPR пептид, KAYARIGNSYFK, которая включает в себя значительные и хорошо сохранились и аминокислоты Lys Arg 301 и 305 для привязки к Hsp90, используя структурную информацию, полученную от TPR2A-Hsp90 комплекса (рис.1А ). Как показано на рисунке1 (B) , оба Hsp90 и Hsp70 связывается с иммобилизованным TPR пептида, а также с аналогичными K D значений, 1,42 × 10 -6 (М) и 0,68 × 10 -6 (М) в возрастающих концентрациях лиганда, соответственно, но относительная обязательные способность к Hsp70 TPR пептид для Hsp90 был 49,9% (данные не приведены). Кроме того, K D значение взаимодействия Hsp90 с хоп был также похожие (4,43 × 10 -6 (М), данные не приведены). Оказалось, что пептид TPR не ингибирует взаимодействие Hsp70 с белком хоп по оценке Biacore биосенсор (рис.1С ), и что этот пептид также не влияют на взаимодействие Hsp90 с FKBP5 или PP5 белков (рис.1D ), которые также имеют Hsp90-связывающий домен TPR, как описано выше[ 17 ]. Тем не менее, было показано, что пептид ингибирует TPR взаимодействия Hsp90 с белком хоп (рис.1D ). Назначенного TPR пептида дальнейшей конденсации его N-конца к спирали III белка Antennapedia homeodomain[ 29 ] для получения клеточной проницаемой вариант, гибридные Antp-TPR пептида, как описано в разделе Материалы и методы секции.

Рисунок 1. Конструкция и характеристики TPR пептида . () Прогнозируемая структура предназначена TPR пептида . Разработан TPR пептид получена из спирали А3 области TPR2A и связан C-концевой области Hsp90 показаны с палкой модели с использованием Рас Мол программного обеспечения. Каждое число показывает положение аминокислот в хопа или Hsp90 белков. (B) Sensorgrams из Hsp90 и Hsp70 связан с иммобилизованным TPR пептид, как определяется с помощью биосенсоров Biacore. Все аналитов (0,3, 1 или 2 μ М Hsp90 и Hsp70) вводили в течение пептид TPR. Прогресс связывания с иммобилизованным пептидом TPR контролировали с помощью следующих увеличение сигнала (ответа), индуцированный аналитов. Тонкие и толстые стрелки указывают время начала и окончания инъекции, соответственно. RU указывает резонанс единицы. (C) Конкурс-тест для Hsp70 связывания с пептидными хоп TPR. Hsp70 (1 μ М) был передан иммобилизованных хоп в отсутствии (контроль) или наличие TPR пептида (700 μ М). SPR сигнала при отсутствии конкурирующих пептидов был использован в качестве ссылки (100% обязательную силу). Тонкие и толстые стрелки указывают запуска и остановки инъекции, соответственно. Равновесие ответ уровней, полученные в присутствии конкурирующих пептиды - TPR пептида была нормализована и заговор против пептида концентрации, как описано в Материалы и методы секции (вставка график). (D) Конкурс Hsp90 привязки к хоп, FKBP5 или PP5 с TPR пептида. Hsp90 (1 μ М) был передан иммобилизованных хоп, FKBP5 или PP5 в наличии или отсутствии повышения концентрации TPR пептид (14, 140 или 700 μ М). SPR сигнала при отсутствии конкурирующих пептидов был использован в качестве ссылки (100% Hsp90 обязательными).
Избирательность гибридных Antp-TPR и значение высоко консервативных аминокислот в пептид TPR для противоопухолевой активности
На основе анализа взаимодействия разработан гибридный Antp-TPR пептид с Hsp90 человека белок, мы тогда рассмотрели рак жизнеспособности клеток для оценки селективности этого пептида в различия между нормальными и раковыми клетками. Как показано на рисунке2 () , Antp-TPR пептид вызвано зависит от концентрации потеря человеческого жизнеспособности клеток рака (в линиях Caki-1, BXPC3, T47D, и A549 клетки), однако, одинаковые концентрации этого пептида не очевидно уменьшить жизнеспособность нормальных человеческих клеточных линий (HEK293T, MRC5 и PE) (рис.2А ) и TPR пептид без Antp, клетка-проницаемой пептид, не влияет на нормальное или раковые клетки (рис.2B ). Конфокальной микроскопии анализа также показали, что Antp-TPR пептид помечены TAMRA проникли раковые клетки, в то время как TPR-TAMRA пептид без последовательности Antp не проникал к раковым клеткам (Дополнительный файл1 ). Кроме того, борьба Antp-пептид не влиял на эти клеточные линии (данные не приведены). Для линий раковых клеток тестирование, Antp-TPR пептид показал IC 50 значений от 20 до 60 μ М. С другой стороны, TPR пептид не показали цитотоксичность по отношению к либо эти раковые клетки линии или нормальные клетки (табл.1 ). Эти результаты показывают, что пептид TPR в сочетании с Antp, клетка-проницаемой пептид обладает селективной противоопухолевой активности, что различие между нормальной и опухолевой клетки. Кроме того, как показано на рисунке2 (C) и2 (D) , Antp-TPR мутант 1 и 2 пептидов не показал выборочный деятельности противоопухолевым, когда эти пептиды были протестированы как с нормальных и раковых клеточных линий. Это говорит о том, что мутировавший аминокислот в Antp-TPR мутанты 1 и 2 являются необходимым условием для селективной противоопухолевой активностью из-Antp TPR.

Таблица 1. ингибирующая концентрация (IC 50 ) из Antp-TPR
Дополнительный файл 1. Внутриклеточные проникновения antennapedia спирали III homeodomain (Antp)-сопряженных Antp-TPR гибридных пептида . BXPC3 клетки инкубировали с 10 μ М carboxytetramethyl родамин (TAMRA) меченных Antp-TPR (Antp-TPR-TAMRA) или TPR (TPR-TAMRA), как указано. Клетки затем анализировали фазового контраста (DIC), флуоресценции (TAMRA-красный) или объединить изображения (ДВС-синдром и TAMRA-красный). Все снимки были сделаны с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии, как описано в методы. Все масштабе баров 50 μ м.
Формат: TIFF Размер: 758Kb Скачать файл
Рисунок 2. Разработан гибридный Antp-пептида TPR демонстрирует избирательность для раковых клеток убийства . (А) указано рака или нормальные клеточные линии инкубируют с Antp-TPR пептида. (B) TPR пептид необходимо сочетать с Antp, клетка-проникающей пептид, к выборочному уничтожать клетки эффект. (C, D) Мутация анализ TPR пептид изучения его влияния на гибели клеток. Указанных линий клеток инкубировали с Antp-TPR мутант 1 (C), в котором хорошо сохранились и Arg и последующие аминокислоты, Иль, в пептид TPR были заменены на Ala, или мутант 2 пептида (D), в которой за последние три аминокислот TPR, Tyr-Phe-Lys, были заменены на три Gly остатков сорвать спираль структуры TPR. Все жизнеспособность клеток анализировали через 72 ч инкубации тест пептиды, как описано Материалы и методы секции. Данные представляют собой среднее ± стандартное отклонение от эксперименты, проведенные в трех экземплярах.
Конкурс TPR2A-опосредованного взаимодействия белка разработана TPR пептид
Кроме того, мы исследовали, является ли разработаны TPR пептид был в состоянии конкурировать специально для взаимодействия Hsp90 с доменом TPR2A из-хоп, которая необходима для правильного складывания несколько онкогенных белков в раковых клетках [ 18 - 20 ]. Hsp90 был передан сенсорный чип проведения иммобилизованных очищенного рекомбинантного домена TPR2A от человека хоп либо в отсутствии или присутствии увеличивающихся концентраций TPR пептид (рис.3 ). Сигнал SPR в отсутствие пептида конкурентом был использован в качестве ссылки (100% обязательную силу) для нормализации сигналов для Hsp90 обязательным записан в присутствии пептида. Взаимодействие домена TPR2A хмеля с Hsp90 был боролись за по TPR пептид (рис.3А и3C ). В отличие от пептида TPR борьба и TPR мутант пептиды 1 и 2 не продемонстрировали какого-либо взаимодействия белка при анализе со скоростью до миллимолярных концентрации (рис.3B и3C ). Эти результаты показывают, что разработан TPR пептид конкретного конкурента, способные ингибировать взаимодействие между Hsp90 и домен TPR2A из-хоп, и что аминокислоты целевых мутагенеза в нашем эксперименте имеют решающее значение для взаимодействия этого белка, чтобы произойти.

Рисунок 3. Конкурс Hsp90 привязки к домена TPR2A хмеля . Hsp90 (1 μ М) был передан иммобилизованных TPR2A область человеческого хоп (5000 единиц резонанс [RU]), в отсутствие или присутствие на повышение концентрации TPR () или TPR схватка (B) пептид (1,4, 14, 140, 280, и 700 μ М и 1 мм). SPR сигнала при отсутствии конкурирующих пептидов был использован в качестве ссылки (100% обязательную силу). (C) Равновесие ответ уровней, полученные в присутствии конкурирующих пептиды - TPR (KAYARIGNSYFK), TPR схватка (RKFSAAIGYNKY), TPR мутант 1 (KAYAAAGNSYFK), или TPR мутант 2 (KAYARIGNSGGG) - были нормализованы и заговор против пептида концентрации, как описано в Материалы и методы секции.
Характеристика, убивающих рак клеток и потере клиента белков Antp-TPR пептид
Как упоминалось ранее, взаимодействие Hsp90 с хопа в раковых клетках имеет большое значение для складывания несколько белков, в том числе сурвивина онкоген, который является членом ингибитор апоптоза семья ген [ 27 ]. Кроме того, Antp-TPR имеет селективное цитотоксическое активность в отношении раковых клеток и является ингибитором взаимодействия Hsp90 с доменом TPR2A хмеля (рис.2 и3 ). Эти результаты побудили нас исследовать вопрос о том Antp-TPR вызывает апоптоз в раковых клетках. Как оценивается анализ потока цитометрии, аннексина В или каспазы 3 и 7 положительных клеток было обнаружено, когда Antp-TPR пептид был добавлен к раку молочной железы T47D клетки (рис.4А , средней и правой панелей переулок), предполагая, что этот пептид вызывает гибель раковых клеток за счет механизм апоптоза (рис.4А , средней и правой панелей переулок). С другой стороны, не было появление аннексина V-меченых HEK293T клеток после добавления этого гибрида пептид (рис.4А , левая панель переулок). В совокупности с фигурами2 и3 , было показано, что Antp-TPR пептид разработан в этом исследовании, при условии, селективность к раковым клеткам, различия между нормальными и раковыми клетками.

Рисунок 4. Характеристика, убивающих рак клеток и потере клиента гибридных белков Antp-TPR пептида . (А) HEK293T и T47D клетки, обработанные (+) или без (-) Antp-TPR пептид (68 μ М) были проанализированы после 24 часов по двухцветными проточной цитометрии для аннексина V (левой и средней полосы панелей) или каспазы 3 и 7 (правой панели переулок) маркировки в зеленом канале, и пропидий йодида (PI) окрашивание в красный канал, как описано в Материалы и методы секции. Процент клеток в каждом квадранте указана, а эксперименты проводились в два раза с аналогичными результатами. (В) Потеря белков Hsp90 клиента. T47D клетки инкубировали с Antp-TPR пептид (68 μ М) в течение 48 ч и проанализированы западных промокательной с указанными антителами. (C) Вестерн-блот анализ Hsp90, Hsp70, и сурвивина выражение в нормальных и опухолевых клеточных линий HEK293T, Caki-1, BXPC3, T47D, и A549. Сотовые выдержки из этих клеточных линий были исследованы на экспрессию белка на Вестерн-блот анализ. β -актин был использован в качестве управления загрузкой.
Когда мы исследовали уровни белков Hsp90 клиента после внутриклеточного загрузки Antp-TPR пептид, T47D клетках, обработанных Antp-TPR выставлены потеря нескольких белков Hsp90 клиента, в том числе сурвивина, CDK4, и Акт, по оценке западных промокательной (рис. 4B ). В противоположность этому, Antp-TPR пептида не влияют уровня Hsp90 себя (рис.4B ). При нормальных и опухолевых клеточных линий (HEK293T, Caki-1, BXPC3, T47D, и A549) получил тепловой шок, до-регулирование Hsp90 и Hsp70 наблюдается в раковых клетках, но не в нормальных клетках HEK293T (Дополнительный файл2 ). Кроме того, до-регулирование Hsp70 после лечения с помощью этого пептида не наблюдалось в обеих рака и нормальных клеточных линиях (Дополнительный файл2 ). Когда мы исследовали уровни экспрессии Hsp90, Hsp70, и сурвивина в этих клеточных линий с использованием западных промокательной, было обнаружено, что экспрессия Hsp90 были почти равны между нормальными и раковыми клетками, однако, был очень сурвивина выражается в линиях раковой клетки, и уровень экспрессии Hsp70 отличался среди этих клеточных линий (рис.4С ). Эти результаты показывают, что Antp-TPR пептид разработан в данном исследовании, может повлиять клеточного выживания пути в раковых клетках, конкурируя с cochaperone найма, которая необходима для правильного сворачивания белков Hsp90 клиента.

Дополнительный файл 2. Влияние теплового шока или Antp-TPR пептид лечения на уровни экспрессии Hsp90 и Hsp70 белка в нормальных и раковых клеток . (А) Вестерн-блот анализа в нормальных и опухолевых клеточных линий (HEK293T, Caki-1, BXPC3, T47D, и A549), получающих теплового шока. Клеточные экстракты через 2 часа термической обработки шок (43 ° С) исследовались на экспрессию Hsp90 и Hsp70 на Вестерн-блот анализа с использованием специфических антител. (B) уровни экспрессии Hsp70 в нормальных и опухолевых клеточных линий (HEK293T, Caki-1, BXPC3, T47D, и A549) рассматриваются с гибридными Antp-TPR пептида. Клеточные экстракты после лечения Antp-TPR пептида были исследованы на экспрессию Hsp70 на Вестерн-блот анализа с использованием специфических антител. β -актин был использован в качестве управления загрузкой.
Формат: TIFF Размер: 175Kb Скачать файл
Противоопухолевую активность Antp-TPR пептида в естественных условиях
Для оценки противоопухолевого действия Antp-TPR пептида в ксенотрансплантата модели человеческого рака, BXPC3 клетки рака поджелудочной железы были имплантированы подкожно в athymic голым мышам и животных лечили Antp-TPR пептида. Контрольная группа выставлены прогрессивного роста опухоли, достигнув 749 мм 3 в день 58 (рис5А ). С другой стороны, администрация Antp-TPR пептид (1 или 5 мг / кг, вводят внутривенно три раза в неделю в течение 3 недель) подавляется рост опухоли замечательно. В день 58, средний объем опухоли был 371 мм 3 в 1 мг / кг доза группы и 204 мм 3 в 5 мг / кг доза группе ( P <0,05 по сравнению с контрольной группой) (рис.5А ). Иммуногистохимическое окрашивание также показали, что Antp-TPR пептид привело к потере клиентов Hsp90 белка (CDK4) в BXPC3 опухолей в естественных условиях после лечения, хотя опухоли от солевых группа выставлена ​​обширная маркировки этого белка (рис.5B ). Кроме того, гистологического исследования печени, почек и легких в равной степени ничем не примечательный в физиологическом растворе или гибридных пептид-мышей (рис.5C ). Эти результаты позволяют предположить, что новый дизайн гибридных Antp-TPR пептид успешно вызывает опухоль смерти через потерю белков Hsp90 клиента в естественных условиях .

Рисунок 5. противоопухолевую активность гибридных Antp-TPR пептида в естественных условиях . (А) BXPC3 клетки рака поджелудочной железы были имплантированы подкожно в athymic голым мышам. Внутривенная инъекция либо PBS (контроль) или Antp-TPR пептид (1 или 5 мг / кг) была предоставлена ​​из 4-й день, как указано стрелками. В каждой группе было шесть животных (п = 6), а опыты были повторены дважды. Данные выражены как среднее ± стандартное отклонение. (B) Утрата Hsp90 клиента белка (CDK4) в опухолях получавших Antp-TPR пептида в естественных условиях . BXPC3 опухоли из физиологического раствора или Antp-TPR пептид (5 мг / кг) у подопытных животных были собраны в конце лечения и проанализированы с помощью антител к CDK4 по иммуногистохимии. Шкала баров, 25 μ м. (C) При гистологическом исследовании после лечения Antp-TPR пептид гибрид. Изображения (x400 увеличении) печени, почек и легких у мышей после лечения с помощью физиологического раствора (контроль), или Antp-TPR пептид (5 мг / кг), в девяти случаях были получены путем окрашивания гематоксилином и эозином (H & E).
Обсуждение

В этом исследовании мы разработали, определены, и характеризуется TPR пептид, роман противоопухолевые пептидомиметик по образцу обязательным интерфейс между Hsp90 и домен TPR2A хмеля. Как показано в недавней структуры подход, TPR2A различие между С-концевой пять остатков Hsp90 (MEEVD) и С-концевой последовательности Hsp70 (PTIEEVD) со своим основным шесть спиралей (A1, B1, A2, B2, A3 и B3)[ 17 , 30 ]. В этих спиралей, Lys Arg 301 и 305 из спирали А3 особенно важно для их взаимодействия водородных связей с боковых цепей Asp и Glu остатков Hsp90 С-концевой пептид[ 17 ]. Эта информация побудило нас разработать пептид использованием домена TPR2A хмеля, в том числе хорошо сохранились остатки Arg 305 спирали А3, которые могли бы конкурировать по взаимодействию с Hsp90, а для тестирования цитотоксичности этого пептида в пробирке и его противоопухолевой активности в естественных условиях . Интересно, что оба Hsp90 и Hsp70 были способны связывать разработан TPR пептид (рис.1В ), однако, относительная обязательным способность Hsp70 на этот пептид был ниже, чем у Hsp90, и этот пептид не смогли препятствовать взаимодействию с Hsp70 хоп белка (рис.1С ), а также взаимодействие Hsp90 с FKBP5 или PP5 (рис.1D ). Кроме того, TPR пептид ингибирует взаимодействие Hsp90 с хопа в частности. Эти результаты показывают, что разработан пептида в этом исследовании является специфическим ингибитором взаимодействия Hsp90 с хоп белка. Как показано на рисунке (2А и2B ) и дополнительный файл1 , предназначен гибридных Antp-TPR пептид, со своей клеточной проницаемой последовательностях, полученные homeodomain Antennapedia, продемонстрировал селективной противоопухолевой активностью, различия между нормальными и раковыми клетками. Было также показано, что мутации TPR пептид заменяя хорошо сохранились остатки Arg и последующего Иль в TPR2A спирали А3 с двойным Ала (мутант 1) приводившая к потерять и его способность подавлять Hsp90-TPR2A взаимодействия и его противоопухолевой активности ( данные2B, C , и3 ). Другая мутация TPR пептида, в котором Tyr-Phe-Lys был заменен с тройным Gly сорвать спиральную структуру (мутант 2), как оказалось, эффект похож на мутанта 1, предполагая, что эти аминокислоты являются критическими для ингибирования и противоопухолевая активность.

Интересно, что Antp-TPR пептида раковых клеток конкретного в его цитотоксическую активность и менее цитотоксическое действие на нормальные клетки, в том числе HEK293T, ПЭ, и MRC5 (рис. 2А ), хотя уровни экспрессии Hsp90 не очень сильно отличаются между нормальными и раковыми клетками (рис.4С ). В противоположность этому, сурвивина была выражена высокая в раковых клетках (рис.4C ), а чувствительность этих линий раковых клеток к Antp-TPR коррелирует с выражением этого белка (рис.2А ). Хорошо известно, что антиапоптотического белки, такие как сурвивина более выражено в раковых клетках, играть значительную роль в подавлении апоптоза или гибель клеток, и нокдаун этих белков в раковых клетках внимания к апоптозу[ 27 , 28 ]. Поскольку раковые клетки, обработанные этот гибрид пептида аннексина V и 3 каспазы, 7 положительных по оценке методом проточной цитометрии, и этот пептид также вызвало потерю белков Hsp90 клиентов, включая сурвивина (рис.4 ), мы предлагаем механизм действия Antp-TPR пептида раковыми клетками убийства следующим образом. Во-первых, Antp-TPR пептид ингибирует Hsp90-Hop взаимодействия, и это влияет на торможение правильного складывания этих белков Hsp90 клиента, включая анти-апоптотических белков, таких как сурвивина, и этот эффект может иметь решающее значение особенно в раковых клетках вызывают гибель клеток путем апоптоза механизм. Кроме того, было также обнаружено, что Antp-TPR пептид не вызывало до-регулирование Hsp70 после лечения с помощью этого пептида (дополнительный файл2 ). Поэтому предполагается, что этот пептид может дать дополнительные преимущества по сравнению с Hsp90 ориентированных небольшие соединения, так как обычные Hsp90 ингибиторы АТФазы вызывает компенсационных до регуляции Hsp70, которые, вероятно, коррелирует с уменьшением противораковой активностью, как сообщалось ранее[ 36 , 37 ]. Было также продемонстрировано, что Antp-TPR пептид оказали значительное противоопухолевую активность у мышей xenografted с человеческим раком поджелудочной железы (BXPC3) приведет к потере CDK4, который является одним из Hsp90 клиента белков в опухоли. (Рис.5А и5B ), предполагая, что этот гибрид пептид администрируемых внутривенно проникает опухолевых клеток, ингибирует взаимодействие Hsp90 с хоп взаимодействия, приводит к потере белков Hsp90 клиента, и индуцирует противоопухолевую активность в естественных условиях с аналогичным механизмом показано на анализ в лабораторных условиях. Более того, гистологического исследования предположили, что управляется Antp-TPR пептид не нанесло серьезный ущерб главных органов (печень, почки и легкие) и нормальных тканей, и любое аномальное поведение или потеря аппетита после лечения с помощью этого пептида не было и наблюдается. Эти результаты позволяют предположить, что этот пептид может не вызывать серьезных побочных эффектов после лечения. Взятые вместе, эти особенности предназначены Antp-TPR пептид будет предлагать привлекательные новых противораковых терапевтический выбор для молекулярных целевой терапии рака.

Ранее мы сообщали, противоопухолевая активность иммунотоксинов, включая таргетинг составляющей, такой как лиганд или антитела для обеспечения избирательности раковой клетки, и убийство фрагмент, таких как белок токсина [ 38 - 40 ]. Эти обычные иммунотоксины обычно присутствуют препятствия во время клинического применения, таких как иммуногенность, нежелательно токсичности, трудности в производстве, ограниченный период полураспада, и производство нейтрализующих антител[ 41 - 43 ]. Тем не менее, химический синтез позволяет нам производить пептидов по доступной цене, со стоимостью сравнимой с производства белковых препаратов. Более того, из-за легкого производство пептидов, широкий выбор кандидата пептидов объединения фрагментов для ориентации и токсичность может быть проверена в доклинических настройки.

В последнее время Gyurkocza и др. . сообщил Роман пептидил антагонистом взаимодействия между Hsp90 и сурвивина и показали, что этот пептид причины массовой гибели раковых клеток, но не уменьшает жизнеспособность нормальных клеток[ 25 , 26 ]. Кроме того, он также сообщил, что разработаны новые модули TPR, который связывается с С-конца Hsp90 с высоким сродством, снижение уровня HER2 BT474 HER2-позитивных клеток рака молочной железы, что приводит к гибели этих клеток[ 44 ]. В совокупности с нашим текущим исследования, эти результаты показывают, что пептиды, направленных на Hsp90 может быть мощным и новых селективных противоопухолевых препаратов.

Заключение

Новой конструкции гибридного Antp-TPR пептид, описанных в данном исследовании молекулярного особенности ингибитор Hsp90-Hop взаимодействия, которое имеет решающее значение для складывания несколько белков клиента в раковых клетках. Более того, анализ этого пептида в естественных условиях показало, что он отображает значительное опухоли подавления активности у мышей с человеческой опухоли поджелудочной железы. В силу этих особенностей, Antp-TPR пептид может обеспечить мощный и селективный новой терапии рака, в соответствии с использованием пептидомиметиков в целевых терапии рака[ 45 ]. Результаты этого исследования помогут в дальнейшем разъяснении лечения рака таргетинга Hsp90.

Сокращения

Hsp90: белка теплового шока 90; хопа: p60/Hsp-organizing белка; TPR: tetratricopeptide повторить; Antp: antennapedia homeodomain последовательности; IC50: пептид концентрации вызывающих 50% ингибирование контролировать рост клеток; PI: пропидий йодида; SPR: поверхностных плазмонов резонанса; RU: резонанс единицы; SDS: додецилсульфата натрия.

Конфликт интересов

Кодзи Каваками является основателем и владельцем акции добывающих бесконечность, Inc другие авторы раскрывают никаких потенциальных конфликтов интересов.

Авторы взносов

TH, М. К., К. К. разработали эту исследовательскую работу. TH предназначен Antp-TPR пептида, и осуществляется связывание, торможение анализа по SPR техники и анализа жизнеспособности клеток в пробирке. KO осуществляется механизм смерти раковых клеток FACS анализ в лабораторных условиях. MH и КО проводится в естественных условиях анализа по модели ксенотрансплантата мыши, KO осуществляется иммуноцитохимии анализ с использованием опухолевых раздел после того как в естественных условиях анализа. TH, М. К., К. К., интерпретировать данные и написал рукопись. Все авторы читали и одобрили окончательный рукописи.

Благодарности

Мы благодарим доктора Toshiya Hayano (Департамент биологических наук и технологий, факультет естественных наук и техники, Ritsumeikan университет) за советы по использованию системы Biacore. Мы также благодарим Рицуко Асаи, Мегуми Кавамото, Нана Кавагути и Куми Кодама (Департамент фармакоэпидемиологии, Киотский университет) за техническую помощь в культуре ткани. Это исследование было организовано грант Olympus Ко

Ссылки

Хартл ФУ, Хайер-Хартл М: молекулярных шаперонов в цитозоле: от зарождающейся цепи сложенном белка.
Наука 2002, 295 : . 1852-1858 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Перл ЛГ, Продрому C: Структурные и в естественных условиях функции Hsp90.
Curr ОПИН структуры Biol 2000, 10 : 46-51. Издательство Полный текст
Молодые JC, Moarefi I, Хартл FU: Hsp90: специализированные, но необходимых белков складной инструмент.
J Сотовые Biol 2001, 154 : 267-273. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Сикорский RS, Boguski MS, Goebl М, Hieter P: повторяющийся мотив аминокислоты кислоты в CDC23 определяет семейство белков и новые отношения между генов, необходимых для митоза и синтез РНК.
Сотовые 1990, 60 : 307-317. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Хирано Т, Киносита N, Морикава К Yanagida М: Привязка спирали с ручкой и отверстием: основные повторяется в С. ротЬе ядерный белок nuc2 +.
Сотовые 1990, 60 : 319-328. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Goebl М, Yanagida М: спираль TPR оснастки: роман мотив повторять белка из митоза в транскрипции.
Тенденции Biochem Научно 1991, 16 : . 173-7 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Lamb JR, Tugendreich S, Hieter P: Tetratrico пептид повторить взаимодействия: в TPR или не TPR?
Тенденции Biochem Научно 1995, 20 : . 257-259 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Blatch GL, Lässle М: tetratricopeptide повторяю: структурный мотив посредническую белок-белковых взаимодействий.
BioEssays 1999, 21 : . 932-939 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Ирмер H, Höhfeld J: Характеристика функциональных областей эукариотических совместно шаперон-хопа.
J Biol Chem 1997, 272 : . 2230-2235 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Продрому C, Panaretou B, Чохан S, Siligardi G, R О'Брайен, Ladbury JE, икра SM, Пайпер PW, Перл Льюис Хэмилтон: цикл АТФ-азы из Hsp90 диски молекулярных "зажим" через переходные димеризации N-концевые домены.
EMBO J 2000, 19 : 4383-4392. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Молодые JC, Obermann WM, Хартл FU: Специфическое связывание белков tetratricopeptide повторять С-концевой 12-кДа области Hsp90.
J Biol Chem 1998, 273 : . 18007-18010 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Рэмси AJ, Рассел LC, Уитт SR, Chinkers М: Перекрытие участков tetratricopeptide связывающий белок повторить и сопровождающих деятельность белка теплового шока 90.
J Biol Chem 2000, 275 : . 17857-17862 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Chen S, Смит Д. Ф.: хоп как адаптер белка теплового шока 70 (Hsp70) и Hsp90 шаперона техники.
J Biol Chem 1998, 273 : . 35194-35200 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Джонсон BD, Шумахер RJ, Росс Д., Тофт DO: хоп модулирует Hsp70/Hsp90 взаимодействий в сворачивания белка.
J Biol Chem 1998, 273 : . 3679-3686 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Моришима Y, Kanelakis KC, Silverstein А.М., Дитмар К., Эстрада L, Pratt ВБ: белка Hsp организатор хоп увеличивает скорость, но не является необходимым для глюкокортикоидных складной рецептора multiprotein Hsp90 основе шаперона системы.
J Biol Chem 2000, 275 : . 6894-6900 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Бозе S, Weikl T, H Bugl, Бюхнера J: сопровождающий функции Hsp90-ассоциированных белков.
Наука 1996, 274 : . 1715-1717 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Scheufler C, Бринкер, Bourenkov G, Пегораро S, L Moroder, Bartunik H, Хартл ФУ, Moarefi I: Структура TPR домен-пептидных комплексов: Критические элементы в сборке-Hsp70 Hsp90 multichaperone машины.
Сотовые 2000, 101 : 199-210. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Скотт доктор медицинских наук, Фридман J: Aberrant складывания белка молекулярной основы рака.
Методы Молекулярная биология 2003, 232 : . 67-76 PubMed Аннотация
Neckers L, Mimnaugh Е, Шульте ТВ: Hsp90 как противораковые цели.
Наркотиками Resist Обновления 1999, 2 : . 165-172 Издатель Полный текст
Рабочий P, F Берроуз, Neckers L, Rosend N: давать наркотики рак шаперона Hsp90: Комбинационные терапевтического использования наркомании онкогенов и опухолевых стресса.
Энн Нью-Йорк Изд-во АН 2007, 1113 : . 202-216 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Айзекс JS, Сюй Вт, Neckers L: Белок теплового шока 90 в качестве молекулярной мишени для рака терапии.
Рак Сотовые 2003, 3 : 213-217. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Sausville Е.А., Томашевского JE, Плющ P: Клиническая развития 17-demethoxygeldanamycin.
Curr Рак лекарственных мишеней 2003, 3 : . 377-383 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Neckers L, Плющ SP: Белок теплового шока 90.
Curr ОПИН Oncol 2003, 15 : . 419-424 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Бассо н.э., Solit DB, Мюнстер П.Н., Rosen N: Ansamycin антибиотики подавляют активацию Akt и циклин D выражение в груди раковые клетки, которые гиперэкспрессией HER2.
Oncogene 2002, 21 : 1159-1166. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Plescia J, Salz W, F Ся, Pennati М, N ЗАФФАРОНИ, Daidone М.Г., Мели М, Dohi T, P Fortugno, Нефедова Y, Д. И. Габриловича, Коломбо G, Альтьери DC: Рациональный дизайн shepherdin, роман противоопухолевых агентов.
Рак Сотовые 2005, 7 : 457-468. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Gyurkocza B, Plescia J, Raskett CM, Гарлик DS, Лоури П. А., Картер Б.З., Andreeff М, М Мели, Коломбо G, Альтьери DC: антилейкемической деятельности shepherdin и молекулярной разнообразие Hsp90 ингибиторов.
J Natl Рак Inst 2006, 98 : . 1068-1077 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Салвесен GS, Дакетт CS: Апоптоз: ИПФ белков: блокирование дороги к смерти.
Nat Rev Мол сотовый Biol 2002, 3 : 401-410. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Альтьери DC: Пользователи выживших, как рак терапевтической мишенью.
Nat Rev Рак 2003, 3 : . 46-54 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Kabouridis PS: Биологические применении белковых технологий трансдукции.
Тенденции Biotechnol 2003, 21 : 498-503. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Бринкер, Scheufler C, Von Der Mulbe F, Флекенштайн B, C Херрманн, Юнг G, Moarefi I, Хартл FU: Лиганд дискриминации по доменам TPR. Актуальность и селективность EEVD-признание в HSP70 - хоп - Hsp90 комплексов.
J Biol Chem 2002, 277 : . 19265-19275 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Laemmli Великобритании: Расщепление структурных белков при сборке головы бактериофага Т4.
Природа 1970, 27 : . 680-685 Издатель Полный текст
Horibe T, H Нагаи, Сакакибара К Хагивара Y, Кикучи М: Ribostamycin ингибирует активность шаперона белка изомеразы дисульфида.
Biochem Biophys Res Commun 2001, 289 : . 967-972 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Чжао Q, Ван J, Levichkin IV, Стасинопулос S, Райан MT, Hoogenraad Нью-Джерси: митохондриальной конкретной реакции на стресс в клетках млекопитающих.
EMBO J 2002, 21 : 4411-4419. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Шин М, Н Nakamuta, Ода-Уэда N, Ларссон Л.И., Фудзивара K: Иммуноцитохимическая демонстрация полиаминов в ядрышек и ядер.
Histochem сотовый Biol 2008, 129 : 659-665. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Молодые JC, Hoogenraad Нью-Джерси, Хартл FU: Молекулярная шаперонов Hsp90 и Hsp70 доставить preproteins для митохондриальных рецепторов импорт Tom70.
Сотовые 2003, 112 : 41-50. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Чжан H, D Чун Ян YC, Нили L, S Tsurumoto, Вентилятор J, Чжан L, M Biamonte, Brekken J, K Лундгрен, Берроуз F: выявление новых биомаркеров для клинических испытаний ингибиторов Hsp90.
Мол рака Там 2006, 5 : 1256-1264. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Песня D, R Chaerkady, Тан переменного тока, Гарсиа-Гарсиа Е, Nalli, Суарес-Готье, Лопес-Риос F, Чжан XF, Соломон, Тонг J, чтение М, Фриц С, и др. :. противоопухолевую активность и молекулярных эффект ударной роман тепла белка 90 ингибитор, IPI-504, при раке поджелудочной железы.
Мол рака Там 2008, 7 : 3275-3284. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Каваками K, M Каваками, Хусейн SR, Пури РК: Ориентация интерлейкина-4 рецепторы для эффективной терапии рака поджелудочной железы.
Cancer Res 2002, 62 : . 3575-3580 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Каваками K, M Каваками, Пури РК: В частности преднамеренного убийства интерлейкина-13 (IL-13), экспрессирующих рецепторы рака молочной железы на Ил-13 слияние цитотоксин в животных моделях болезни человека.
Мол рака Там 2004, 3 : 137-147. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Каваками К Terabe М, Kioi М, Berzofsky JA, Пури РК: внутриопухолевые терапии IL13-PE38 приводит к эффективной CTL-опосредованного suprresion из IL13R альфа2-выражения контралатеральной опухоли.
Clin Cancer Res 2006, 12 : . 4678-4686 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Kreitman RJ: Иммунотоксины для таргетной терапии рака.
AAPS J 2006, 8 : E532-551. PubMed Аннотация | Издатель Полный текст | PubMed Central Полный текст
Ли Z, Ю. Т, Чжао Р, Ма J: Иммунотоксины и терапии рака.
Сотовые Мол Immunol 2005, 2 : . 106-112 PubMed Аннотация
Поузи JA, Khazaeli Мб, Bookman М.А., Nowrouzi, Гризл МЫ, Торнтон J, Кэри DE, Лоренц М., Sing А.П., Siegall ЦБ, LoBuglio А.Ф., Салех МН: Я фазе испытания одноцепочечных иммунотоксином SGN-10 ( BR96 SFV-PE40) у пациентов с солидными опухолями.
Clin Cancer Res 2002, 8 : . 3092-3099 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Cortajarena А.Л., Yi F, Риган L: Разработанный TPR модулей, как новые противораковые агенты.
ACS химической биологии 2008, 3 : . 161-166 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
Гиллемард V, Saragovi HU: Новые подходы для таргетной терапии рака.
Curr Рак наркотиками Цели 2004 года, 4 : . 313-326 PubMed Аннотация | Издатель Полный текст
http://www.translational-medicine.com/content/9/1/8

MRSA ПЕРЕДАЧИ МЕЖДУ ХОМЯКОМ И ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО
ДОБАВЛЕНО 24 ИЮНЯ 2011 ГОДА СКОТТ УИЗ

Чем больше мы ищем, тем больше мы найти, когда дело доходит до MRSA (метициллин-резистентный золотистый стафилококк ). Как люди начинают искать его у разных видов животных, это часто встречается. Мы нашли его у многих видов уже, в том числе собак, кошек, кроликов, свиней, моржи, дельфины и альпака, так что это не большой неожиданностью увидеть недавней статье в Журнале клинической микробиологии ( Феррейра и др., 2011 ) о подозреваемых MRSA передачи между человеком и хомяка.
Случае докладе описывается человек с передовыми муковисцидозом, перенесшие пересадку легких и имели различные другие медицинские проблемы. До другой хирургической процедуре, MRSA был выявлен в ходе регулярной дооперационном скрининга. Носовой и ректальных мазков были затем собраны из трех человек животное хомяков, один из которых был положительным. MRSA изоляты от человека и хомяка были те же, поддерживающий передачу от одного к другому. Учитывая, лежащий в основе здоровья человека проблемы, частые контакты с системой здравоохранения, обычная человеческая происхождения штамм, который был найден, и ограниченные контакты хомяков с другими животными или людьми, то наиболее вероятно, что MRSA был передан от человека к хомяку в этом случае.
Документ завершается: " ?. Если тестирование домашних животных MRSA-инфицированных пациентов можно рекомендовать На данный момент, мы рекомендуем, чтобы MRSA-положительных пациентов, быть информированы, что их животные компаньон может быть потенциальным источником инфекции или реинфекции В наличии MRSA-положительных человека или животного, повышенная гигиена должна быть возбуждено и ненужных тесного контакта следует избегать. Скрининг домашние животные могут быть указаны в ситуациях рецидивирующие инфекции MRSA, несмотря на адекватное лечение или когда пациентов с ослабленным иммунитетом жить в семье. "
Это согласуется с нашими стандартными рекомендациями и попадает большинство ключевых пунктов:
Осведомленность является критической. Люди должны знать, какие риски могут быть и что они могут делать с ними, чтобы они могли принимать обоснованные решения и понимать, почему рекомендации выносятся.
Тестирование домашних животных редко бывает полезна, особенно в отсутствие постоянной проблемой MRSA.
Хорошая гигиена имеют решающее значение.
Я не очень согласен с комментарием, что тестирование домашних животных может быть указано, когда людей с ослабленным иммунитетом в домашнем хозяйстве (хотя комментарий правильно хеджирования, говоря, "может быть указано"). Большой процент населения имеет некоторую степень immunocompromise, и есть огромный спектр от минимальным риском для огромного риска. Даже в группе высокого риска, скрининг сомнительно полезным для меня, потому что на самом деле не изменить то, что я сделаю.
Если бы я экранированный хомяка от высокого риска, человек и обнаружили, MRSA, я бы сказал, что он, вероятно, пришел из человека, то вполне возможно, он может быть передан обратно в человека, что хорошие методы гигиены должны соблюдаться и тесный контакт должен быть ограничено. Там нет индикации (или способности, на самом деле), чтобы лечить хомячка.
Если хомяк был отрицательным, я бы сказал, что, возможно, был отрицательным, потому что скрининг не на 100%, что хомяк мог подвергаться воздействию MRSA у собственника в любой момент, и таким образом управлять неизвестным колонизации и уменьшение вклада человека в хомяка передачи, я бы порекомендовал надлежащих правил гигиены и ограничение тесных контактов.
Если я собираюсь сделать то же самое и с положительным и отрицательным результатом, я не делаю тест.
Этот документ должен быть еще одним напоминанием, что мы живем в сложные отношения с нашими домашними животными, в том числе микробиологически. Хотя нам необходимо рассмотреть вопрос о роли животных в человеческом инфекции (и роли человека в животное инфекция), и нам нужно, чтобы сбалансировать, что с положительными аспектами животное собственности в целях обеспечения максимальной выгоды при минимальных затратах.
http://www.wormsandgermsblog.com/2011/06/articles/animals/pocket-pets/mrsa-transmission-between-hamster-and-human/index.html